操作步骤丨皮质醇ELISA试剂盒简单精准定量
皮质醇elisa试剂盒运用双抗体夹心elisa法定量测定其他血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体中皮质醇含量。
艾美捷皮质醇elisa试剂盒#k003-h1：
检测范围：0.375nmol/l~12nmol/l
灵敏度：0.1
实验原理：将皮质醇(cor)抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的皮质醇(cor)与连接于固相载体上的抗体结合，然后加入生物素化的皮质醇(cor)抗体，将未结合的生物素化抗体洗净后，加入hrp标记的亲和素，再次彻-底洗涤后加入tmb底物显色。tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的皮质醇呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(0.d.值),计算样品浓度。
皮质醇elisa试剂盒组分：
皮质醇elisa试剂盒需自备的设备及试剂：
1. 450±10m滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2.单道或多道微量加液器及吸头
3.稀释样品的印管
4.蒸馏水或去离子水
5.吸水纸
6.盛放洗液的容器
试剂盒的储存及有效期：
1.未开封的试剂盒：所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意，收到试剂盒后请尽快将tmb洗涤液，终止液保存于4℃,其他试剂保存于-20℃。
2.使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20°℃,避免潮湿。
注意：
试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用；使用后的剩余试剂盒建议在*实验后1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。
皮质醇elisa试剂盒标本的采集与保存：
1.血清：
将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4°℃过夜，然后1000×g离心20分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80°℃保存，但应避免反复冻融。
2.血浆：
用edta或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8°℃1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20°℃或-80°℃保存，但应避免反复冻融。
3.组织匀浆：
1)取适量组织块，于预冷pbs(0.01mol/l.ph 7.0-7.2)中清洗去除血液，称重后备用(组织块较大需先剪碎后再匀浆);
2)可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果：首先将组织块移入玻璃匀浆器，加入5-10ml预冷pbs进行充分研磨，该过程需在冰上进行(有条件实验室可选用机器匀浆);得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融进一步处理(超声破碎过程中注意冰浴降温；反复冻融法可重复2次)。
3)将制备好的匀浆液于5000×g离心5分钟，留取上清即可检测。
4.细胞裂解液：
1)贴壁细胞需要先用胰酶消化，离心收集细胞(悬浮细胞可直接离心收集);
2)将收集到的细胞用冷pbs洗3次；
3)物理方法裂解细胞(可先超声破碎细胞，再反复冻融):
i超声破碎：取适量pbs重悬细胞，用一定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂。
ii反复冻融：将待破碎的细胞在-200c以下冰冻，室温融解，反复3次，使细胞溶胀破碎。
4)将标本于2-8 °℃1500×g离心10分钟，收集上清备用。
5.细胞培养上清或其它生物标本：
请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20°℃或-80°℃保存，但应避免反复冻融。注意：
1.以上标本均需密封保存，4℃保存应小于1周，-20℃不应超过1个月，-80°℃不应超过2个月。
2.标本使用前应缓慢均衡至室温，不应加热使之融解。
3.实验前红细胞裂解液必须用标准品稀释液稀释。
皮质醇elisa试剂盒试剂准备
1.使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-250c),试剂不能直接在370c溶解。
2.标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1ml,盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为1000ng/ml。准备7个稀释标准品的印管，每个ep管中加入150μl的标准品稀释液，依次倍比稀释成不同的梯度， 标准品稀释液(0pg/ml)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
3.浓洗涤液：用580ml蒸馏水或去离子水将20ml浓洗涤液稀释至600ml,进行30倍稀释。
皮质醇elisa试剂盒操作步骤：
1.加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μ1,待测样品孔中先加样品
稀释液40μ1,然后再加待测样品10μ (样品*终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
2.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
3.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
4.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
5.加酶：每孔加入酶标试剂50μ1,空白孔除外。
6.温育：操作同3。
7.洗涤：操作同5。
8.显色：每孔先加入显色剂a50μ1,再加入显色剂b50μ1,轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。
9.终止：每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
10.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(0d值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
特异性
本试剂盒用于检测皮质醇(cor),经检测与其它相似物质无明显交叉反应。
由于受到技术及样本来源的限制，不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测，因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。
精密度
精密度用样品测定值的变异系数cv表示。cv(%)= sd/mean×100
批内差：取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测.每份样本连续测定20次，分别计算不同浓度样本的平均值及sd值。
批间差：选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及sd值。
批内差：cv<10%
批间差：cv<12%
皮质醇elisa试剂盒稳定性：
经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂金破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
常用**方法
天津网络医院健康小屋
移动排涝泵车自吸能力强、耐干转、流量范围大
【轴承】通过提升油封密封性，改善钢铁轧机驱动轴性能
SF6密度继电器校验仪主要功能及特点
操作步骤丨皮质醇ELISA试剂盒简单精准定量
自动驾驶汽车量产：“共享出行”或成商用爆点
班产2万块至20万块油炸方便面加工生产线设备在选型时注意的事项
德国buehler SM-6型流量计五个使用注意事项
输液器导管流量测试仪/品质可靠
暗杆楔式闸阀的阀板脱落预防和应急修复
hiraceramics研磨分散用氧化铝球产品特性分析
二氧化碳激光打标机在使用过程中应该注意什么
如何才能做好油缸防尘罩的防漏工作？
对流传热干燥设备 适用于那些方面
要环境，还是要发展？从环保角度看中国企业发展
河南驻马店西门子一级供应商
什么是管型母线?管型母线的设计和布局
行标《综合交通运行监测客运信息数据交换》发布
浆液循环泵积浆液处理是什么样的呢？
艾美捷皮质醇elisa试剂盒#k003-h1：
检测范围：0.375nmol/l~12nmol/l
灵敏度：0.1
实验原理：将皮质醇(cor)抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的皮质醇(cor)与连接于固相载体上的抗体结合，然后加入生物素化的皮质醇(cor)抗体，将未结合的生物素化抗体洗净后，加入hrp标记的亲和素，再次彻-底洗涤后加入tmb底物显色。tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的皮质醇呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(0.d.值),计算样品浓度。
皮质醇elisa试剂盒组分：
皮质醇elisa试剂盒需自备的设备及试剂：
1. 450±10m滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2.单道或多道微量加液器及吸头
3.稀释样品的印管
4.蒸馏水或去离子水
5.吸水纸
6.盛放洗液的容器
试剂盒的储存及有效期：
1.未开封的试剂盒：所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意，收到试剂盒后请尽快将tmb洗涤液，终止液保存于4℃,其他试剂保存于-20℃。
2.使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20°℃,避免潮湿。
注意：
试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用；使用后的剩余试剂盒建议在*实验后1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。
皮质醇elisa试剂盒标本的采集与保存：
1.血清：
将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4°℃过夜，然后1000×g离心20分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80°℃保存，但应避免反复冻融。
2.血浆：
用edta或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8°℃1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20°℃或-80°℃保存，但应避免反复冻融。
3.组织匀浆：
1)取适量组织块，于预冷pbs(0.01mol/l.ph 7.0-7.2)中清洗去除血液，称重后备用(组织块较大需先剪碎后再匀浆);
2)可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果：首先将组织块移入玻璃匀浆器，加入5-10ml预冷pbs进行充分研磨，该过程需在冰上进行(有条件实验室可选用机器匀浆);得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融进一步处理(超声破碎过程中注意冰浴降温；反复冻融法可重复2次)。
3)将制备好的匀浆液于5000×g离心5分钟，留取上清即可检测。
4.细胞裂解液：
1)贴壁细胞需要先用胰酶消化，离心收集细胞(悬浮细胞可直接离心收集);
2)将收集到的细胞用冷pbs洗3次；
3)物理方法裂解细胞(可先超声破碎细胞，再反复冻融):
i超声破碎：取适量pbs重悬细胞，用一定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂。
ii反复冻融：将待破碎的细胞在-200c以下冰冻，室温融解，反复3次，使细胞溶胀破碎。
4)将标本于2-8 °℃1500×g离心10分钟，收集上清备用。
5.细胞培养上清或其它生物标本：
请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20°℃或-80°℃保存，但应避免反复冻融。注意：
1.以上标本均需密封保存，4℃保存应小于1周，-20℃不应超过1个月，-80°℃不应超过2个月。
2.标本使用前应缓慢均衡至室温，不应加热使之融解。
3.实验前红细胞裂解液必须用标准品稀释液稀释。
皮质醇elisa试剂盒试剂准备
1.使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-250c),试剂不能直接在370c溶解。
2.标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1ml,盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为1000ng/ml。准备7个稀释标准品的印管，每个ep管中加入150μl的标准品稀释液，依次倍比稀释成不同的梯度， 标准品稀释液(0pg/ml)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
3.浓洗涤液：用580ml蒸馏水或去离子水将20ml浓洗涤液稀释至600ml,进行30倍稀释。
皮质醇elisa试剂盒操作步骤：
1.加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μ1,待测样品孔中先加样品
稀释液40μ1,然后再加待测样品10μ (样品*终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
2.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
3.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
4.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
5.加酶：每孔加入酶标试剂50μ1,空白孔除外。
6.温育：操作同3。
7.洗涤：操作同5。
8.显色：每孔先加入显色剂a50μ1,再加入显色剂b50μ1,轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。
9.终止：每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
10.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(0d值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
特异性
本试剂盒用于检测皮质醇(cor),经检测与其它相似物质无明显交叉反应。
由于受到技术及样本来源的限制，不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测，因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。
精密度
精密度用样品测定值的变异系数cv表示。cv(%)= sd/mean×100
批内差：取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测.每份样本连续测定20次，分别计算不同浓度样本的平均值及sd值。
批间差：选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及sd值。
批内差：cv<10%
批间差：cv<12%
皮质醇elisa试剂盒稳定性：
经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂金破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
常用**方法
天津网络医院健康小屋
移动排涝泵车自吸能力强、耐干转、流量范围大
【轴承】通过提升油封密封性，改善钢铁轧机驱动轴性能
SF6密度继电器校验仪主要功能及特点
操作步骤丨皮质醇ELISA试剂盒简单精准定量
自动驾驶汽车量产：“共享出行”或成商用爆点
班产2万块至20万块油炸方便面加工生产线设备在选型时注意的事项
德国buehler SM-6型流量计五个使用注意事项
输液器导管流量测试仪/品质可靠
暗杆楔式闸阀的阀板脱落预防和应急修复
hiraceramics研磨分散用氧化铝球产品特性分析
二氧化碳激光打标机在使用过程中应该注意什么
如何才能做好油缸防尘罩的防漏工作？
对流传热干燥设备 适用于那些方面
要环境，还是要发展？从环保角度看中国企业发展
河南驻马店西门子一级供应商
什么是管型母线?管型母线的设计和布局
行标《综合交通运行监测客运信息数据交换》发布
浆液循环泵积浆液处理是什么样的呢？