c-127细胞是源自rⅲ小鼠乳腺癌的未经转化的克隆株;c-127细胞培养上清液没有逆转录酶活性。c-127细胞常用于肉瘤病毒诱导的聚集呈现及牛刺瘤病毒的体外定量测试。最近,c-127细胞常用作牛刺瘤病毒dna质粒转化的受体。
种属小鼠年龄(性别)
组织来源乳房
生长特性贴壁
细胞形态上皮细胞样
生长培养基dmem高糖+10%fbs(+1%p/s
培养条件气相:空气,95%;co2,5%温度:37℃
c127小鼠乳腺肿瘤细胞传代操作步骤:
一、贴壁细胞传代
1.提前将培养基、pbs放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
2.吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量pbs润洗细胞。
3.加入适量胰mei,使胰mei的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰mei,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰mei作用。
4.c127小鼠乳腺肿瘤细胞用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡。
5.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
二、悬浮细胞传代
1.将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min。
2.弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液。
3.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
c127小鼠乳腺肿瘤细胞培养的过程中,经常见到黑色的颗粒或小黑点,这种情况是怎么引起的呢?该怎么避免呢?原因:
黑点,大概有细胞本身带的,环境有的,还有人身上带进细胞间的,还有就是血清和培养基
1、如果小黑点有增殖趋势,那么就有可能是污染了,需要处理;
2、如果小黑点没有增殖趋势,且不影响细胞生长,也不影响实验的话,则可能
a、是“黑胶虫”,黑胶虫究竟是一种生物还是非生物,本身就存在争议。有人认为是从血清中来的一种原虫,也有人认为是细菌,或是真菌,也有人认为是血清中的蛋白的结晶。“黑胶虫”可寄生于动物细胞,也可以生存于培养基中,依靠c127小鼠乳腺肿瘤细胞和培养基中的营养为生,并随细胞传代而传代。“黑胶虫”与细胞竞争性生长,开始时对细胞并没有什么影响,但当黑胶虫的数量多到一定程度的时候,细胞生长就会受到影响直至死亡,严重影响了科研活动的开展和进行。以前(这个至少是10年以前),很多实验室在养细胞时用国产血清,那时的血清可能质量不过关,有所谓的“黑胶虫”,但是也没有明确的鉴定。但是现在的血清,即使国产的,产品里这种现象就少见了。
b、是细胞碎片,或血清里德沉淀析出,在做布朗运动。
大鼠血管平滑肌细胞zl-056796 usmc 1×10⁶cells/t25培养瓶
人膀胱移行细胞癌zl-056795 um-uc-3 1×10⁶cells/t25培养瓶
大鼠骨肉瘤细胞zl-056794 umr-106 1×10⁶cells/t25培养瓶
人乳腺导管瘤细胞zl-056793 uacc-812 1×10⁶cells/t25培养瓶
gfp标记的小鼠子宫颈癌细胞zl-056792 u14-gfp 1×10⁶cells/t25培养瓶
小鼠子宫颈癌细胞zl-056791 u14 1×10⁶cells/t25培养瓶
人脑星形胶质母细胞瘤zl-056790 u-118 mg/u118mg 1×10⁶cells/t25培养瓶
人甲状腺导管癌细胞zl-056789 tt 1×10⁶cells/t25培养瓶
正常小鼠睾丸sertoli细胞zl-056788 tm4 1×10⁶cells/t25培养瓶
小鼠淋巴瘤细胞zl-056787 l5178y tk+/-clone(3.7.2c)1×10⁶cells/t25培养瓶
人食管癌细胞zl-056786 te-11 1×10⁶cells/t25培养瓶
人食管癌细胞zl-056785 te-10 1×10⁶cells/t25培养瓶
*人血管平滑肌细胞zl-056784 t/g ha-vsmc 1×10⁶cells/t25培养瓶
人肾上腺皮质癌细胞(dmem)zl-056783 sw-13+dmem 1×10⁶cells/t25培养瓶
人滑膜肉瘤细胞zl-056782 sw 982 1×10⁶cells/t25培养瓶
人膀胱移行细胞癌zl-056781 sw 780 1×10⁶cells/t25培养瓶
人胰腺癌细胞zl-056780 sw1990/sw-1990 1×10⁶cells/t25培养瓶
人软骨肉瘤细胞zl-056779 sw 1353 1×10⁶cells/t25培养瓶
小鼠骨髓瘤细胞zl-056778 sp2/0-ag14 1×10⁶cells/t25培养瓶
人胃癌细胞zl-056777 snu-5 1×10⁶cells/t25培养瓶
人神经母细胞瘤细胞zl-056776 sk-n-mc 1×10⁶cells/t25培养瓶
人肾母细胞瘤细胞zl-056775 sk-nep-1 1×10⁶cells/t25培养瓶
人神经母细胞瘤细胞zl-056774 sk-n-be(2)1×10⁶cells/t25培养瓶
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