生物体内巯基主要包括谷胱甘肽巯基和蛋白质巯基。前者不仅能够修复氧化损伤的蛋白质,而且参与活性氧清除,后者对于维持蛋白质构象具有重要作用。通过测定总巯基含量和gsh含量,能够间接测定蛋白质巯基含量。总巯基含量检测试剂盒的准确性高,重复性和抗干扰性强,使用方便。通过分光光度法来测定羰基化合物的含量可以为生理生化的研究提供很大的帮助。
利用总巯基含量检测试剂盒计算总巯基的计算公式:
1、组织:
(1)按样本鲜重计算
总巯基含量(μmol/g 鲜重)=0.5×(a 测定-a 对照)÷(a 标准- a 空白)×v 样总÷w
=0. 5×(a 测定-a 对照)÷(a 标准- a 空白)÷w
(2)按样本蛋白浓度计算
总巯基含量(μmol/prot)= 0.5×(a 测定-a 对照)÷(a 标准- a 空白)÷cpr
2、血清、培养液:
总巯基含量(μmol/ l)=0.5× (a 测定-a 对照)÷(a 标准- a 空白) ×1000
=250×(a 测定-a 对照)÷(a 标准- a 空白)
0.5:标准品还原型谷胱甘肽的浓度,µmol/ml; v 样总:加入提取液体积,1ml;w:样品质量,g ;cpr,样本蛋白浓度,mg/ml。
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