厌氧培养箱安装
1.整机应安放在温差较小、操作方便的位置,应避免阳光直晒和远离采暖设备,放置平稳;
2.将混合气瓶、氮气瓶安放平稳,并分别装好减压阀(含压力表),安置在适当位置;
3.接上气路并检查气路,为防止漏气,必要时可在各接管处用密封胶粘合;
厌氧培养箱使用
(一)操作室厌氧环境形成:
1.按使用要求放置好必要的附件和器具;
2.通电源开照明灯,开温控仪,调节所需温度;
3.操作室内放入1000g钯粒(封闭)和500g干燥剂,并放入美兰指示纸(封闭);
4.关紧取样室内外门,并抽真空校验;
5.操作室内次置换(氮气置换):
a.把乳胶手套套在观察板法兰圈上并扎紧
b.接通氮气进气路,打开氮气控制阀1,使手套鼓起,关闭阀门1,然后扎紧袋口;
6.操作室第二次置换(氮气置换)重复一次充氮过程,取样室先抽真空,并注意随时用脚踏开关开闭排气。如此连续三次氮气置换。
7.操作室第四次置换(混合气体置换):
(混合气体配比为n285%、h210%、co25%)
a.调换气路打开混合气阀3进气,充气时取样室先抽真空,并随时用脚踏开关开闭排气;
b.关掉混合气体阀3,并打开阀5,使混合气体经过流量计,调整流量计,流量为每分钟10ml左右;
c.混合气体重复2-3次转换,经过上述过程,基本形成厌氧环境。
8.操作室内打开粑粒除氧剂,接通除氧催化器电源进行催化除氧,一小时后打开美兰指示纸观察其变况,不变色为操作室内达到厌氧环境;
9.开紫外线灭菌灯,室内进行灭菌处理,灭菌时间按具体实验自定。
(二)菌种的置入和培养:
1.检查取样室内门并关紧;
2.打开取样室外门,将菌种放入取样室后即关上外门;
3.取样室充氮置换三次过程:打开真空泵,先抽真空度500ml汞柱(66kpa)以上停,然后人工打开氮气阀2进气,使指针回复零位,关掉阀2。第二次重复操作一次。第三次操作时,使真空度500ml汞柱(66kpa)以上停,然后打开阀4进混合气,使指针回复零位,关掉阀
4。取样室充氮置换三次过程结束;
4.如选定真空度较低就需要增加置换的次数;
5.取样室外门开启、关紧,再抽低真空度100ml汞柱(13kpa)检验;
6.厌氧培养箱需要*连续使用的条件:
a.每天在操作室内打开美兰指示纸观察,如不正常就必须重新换气;
b.要*连续输入微量的混合气体,使补进的氮气能和微量的氧结合通过催化吸收,保证室内厌氧状态,补入混合气流量选定为每分钟10ml左右;
c.连续培养运行一天,更换一次除氧剂和干燥剂。
d.操作室内温度可任意选择和控制。
7.混合气瓶、氮气瓶输出压力调整:调节减压阀,使输出压力0.1mpa左右。
厌氧培养箱使用步骤
厌氧培养箱是一种在无氧环境下进行细菌培养及操作的装置,可培养难生长的厌氧升物,又能避免以往厌氧生物在大气操作时接触氧气而死亡的危险 。广泛应用于医学、免疫学、遗传学、微生物、农业科学、药物学的研究和生产,已经成为上述领域实验室常用的仪器。我们在使用如何正确规范的操作厌氧培养箱呢,下面就做简单介绍
一、操作形成厌氧环境
1、按使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室内放入二个无毒塑料袋。
2、通电源开照明灯,开控温仪,调节所需温度及安全温度。
3、操作室内放入1000g钯粒(封闭)和500g干燥剂,并放入美兰指示剂(封闭)。
4、 关紧取样室内外门,并抽真空校验。
5、操作室内次置换(氮气置换):
(1)先用橡皮管插入操作室内进气口,另一头插入塑料袋。
(2)接通氮气进气路,打开氮气控制阀,使二只塑料袋充足氮气,然后扎紧袋口。
(3)把乳胶手套套在观察板法兰圈上并扎紧。
(4)把塑料袋内氮气渐渐地放于操作室内,至全部放出。
6、操作室第二次置换(氮气置换)重复一次充氮过程,并注意随时用脚踏开关开闭排气。
7、操作室第三次置换(混合气体置换):
(混合气体配比为:n2 85%;h2 10%;co2 5%)。
(1)调换气路打开混合气道通阀门进气,充气时要随时脚踏开关开闭排气。
(2)混合气充满塑料袋后,关掉混合气直通阀(三通阀),使混合气经过流量计输入操作并调整流量计,流量为每分钟10毫升左右。
(3)把塑料袋内混合气渐渐排于操作室内。
(4)通过三次换气后,操作室内气体含氧量已处于极微量状态。
8、操作室内打开钯粒除氧剂,接通除氧催化器电源进行催化除氧,一小时后打开美兰指示剂(美兰安瓶)观察其变况,不变色为操作室内达到厌氧环境。
9、开紫外线灭菌灯,室内进行灭菌处理。灭菌时间自定。
二、菌种的置入和培养
1、检查取样室内门并关紧之。
2、打开取样室外门,将菌种放入取样室后即关上外门。
3、 取样室充氮置换三次过程:先抽真空度500毫米汞柱(66kpa)以上停,然后人工打开氮气阀门进气,使指针回复零位后进行下次操作。
4、如选定真空度较低就需要增加置换的次数。
5、取样室内外门开启,关紧要抽低真空度100毫米汞柱(13 kpa)检验及帮助操作。
6、厌氧培养箱需要*连续使用的条件:
(1)每天在操作室内打开美兰指示剂观察,正常情况下使用。如不正常就必须重新换气。
(2)要*连续输入微量的混合气体,使补进的氢气能和微量的氧结合通过催化吸收,保证了室内厌氧状态,补入混合气流量选定为每分钟10毫升左右。
(3)连续培养运行一天,更换一次除氧剂和干燥剂。
7、接种棒灭菌器的应用:
(1)随时用镍铬电热丝使电极短路而变赤热以进行杀菌(接种棒)。
(2)熔蜡处可直接放上,试管封蜡口旋转熔蜡。
8、操作室里的培养箱内的温度不可任意选择和控制。
9、调整混氮气瓶、合气瓶输出压力:调节减压阀,使输出压力为0.1mpa左右。
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