体外研究是减少动物实验的基本工具,具有广泛的应用,包括疾病建模(如衰老和癌症)、组织再生、基因治疗、药物开发和疫苗生产。此外,近几年来,体外三维(3d)培养的建立,如球体和类器官的出现,提供了更强大和可靠的人体组织模型。因此,3d培养是未来取代动物模型的一种很有前景的策略。然而,细胞培养及相关技术,包括3d培养和生物打印,通常依赖于动物源性产品,如fbs、胰蛋白酶、胶原蛋白、明胶等。
fbs被认为是培养基的通用补充剂,因为它的组成包括激素、维生素、转运蛋白和促进细胞粘附、增殖和代谢的生长因子。
fbs在细胞生长培养基中的浓度根据细胞类型从2%到20%不等,常用的添加浓度是10%,fbs可以影响细胞增殖。
例如,研究表明,人骨髓间充质干细胞(bm - mscs)的增殖与培养基中fbs的百分比成正比。当fbs浓度从5%增加到20%时,bm - msc增殖呈浓度依赖性增加。另一方面,免疫抑制分子,如白细胞介素10和吲哚胺2,3双加氧酶1,在7%和10%的fbs中产量比较好,而在5%或20%的fbs中产量减少,因此强调了根据实验目的选择正确的fbs浓度来维持培养中的msc的重要性。有趣的是,正如abbasalipour等人所证明的那样,fbs还可以提高细胞转导的效率。他们发现,在细胞接种前用fbs包被的板增加了附着的k562细胞(人淋巴母细胞)的数量,并且与未包被的条件相比,慢病毒转导效率提高了。fbs也被广泛用作细胞迁移试验中的化学引诱剂。
在细胞培养中使用fbs存在与污染物相关的缺点,如内毒素、支原体、病毒和朊病毒蛋白,但也由于不同批次的未定义成分。为了证明这一点,来自不同制造商的三批fbs被证明对成人培养的色素视网膜上皮细胞的生长有不同的促进作用。通过蛋白质组学分析,发现促生长能力最高的fbs批次含有其他两个批次未检测到的生长因子和蛋白质,如转化生长因子β1 (tgf‐β1)、胶质生长因子和胰岛素样生长因子结合蛋白4。不同季节获得的血清批次质量的变化也会通过改变细胞生长、活力和形态影响实验的可重复性。
综上所述,在进行细胞实验时,需要严格挑选高品质的胎牛血清。选购时,需关注内毒素、微生物检测、相关蛋白检测等指标,还应关注批次库存等情况。
ausbian进口胎牛血清,澳洲血源,多批次平行供应,购买前提供不同批次试用服务,且血清内毒素含量低,各项微生物检测均合格。
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