1.核酸的换算:
(1.1) 摩尔数与质量:
1 mg 1,000bp dna = 1.52 pmol
1 mg puc18/19 dna (2,688bp) = 0.57 pmol
1 mg pbr322 dna (4,361bp) = 0.35 pmol
1 mg sv40 dna (5,243bp) = 0.29 pmol
1 mg fx174 dna (5,386bp) = 0.28 pmol
1 mg m13mp18/19 dna (7.250bp) = 0.21 pmol
1 mg l phage dna (48,502bp) = 0.03 pmol
1 pmol 1,000bp dna = 0.66 mg
1 pmol puc18/19 dna (2,688bp) = 1.77 mg
1 pmol pbr322 dna (4,361bp) = 2.88 mg
1 pmol sv40 dna (5,243bp) = 3.46 mg
1 pmol fx174 dna (5,386bp) = 3.54 mg
1 pmol m13mp18/19 dna (7.250bp) = 4.78 mg
1 pmol l phage dna (48,502bp) = 32.01 mg
(1.2) 光吸收值与浓度:
1 od260 dsdna = 50 mg/ml = 0.15 mmol/l
1 od260 ssdna = 33 mg/ml = 0.10 mmol/l
1 od260 ssrna = 40 mg/ml = 0.12 mmol/l
1 mmol/l dsdna = 6.7 od260
1 mmol/l ssdna = 10.0 od260
1 mmol/l ssrna = 8.3 od260
(1.3) 分子量:
1个脱氧核糖核酸碱基的平均分子量为333 daltons
1个核糖核酸碱基的平均分子量为340 daltons
(1.4) 核酸末端浓度:
环状dna:
pmol ends = pmol dna ′ number of cuts ′ 2
线性dna:
pmol ends = pmol dna ′ (number of cuts ′ 2 + 2)
1 mg 1,000bp dna = 3.04 pmol ends
1 mg puc18/19 dna (2,688bp) = 1.14 pmol ends
1 mg pbr322 dna (4,361bp) = 0.7 pmol ends
1 mg sv40 dna (5,243bp) = 0.58 pmol ends
1 mg fx174 dna (5,386bp) = 0.56 pmol ends
1 mg m13mp18/19 dna (7.250bp) = 0.42 pmol ends
1 mg l phage dna (48,502bp) = 0.06 pmol ends
2.核苷酸的换算:
(2.1) 分子量:
mw (da) = 333 ′ n (number of bases)
(2.2) 浓度:
c (mmol/l or pmol/ml) = od260 / (0.01 ′ n)
c (ng/ml) = od260 ′ mw / (0.01 ′ n)
mw —— molecular weight
n —— number of bases
od260 —— absorbance at 260 nm
(2.3) 双链dna与寡核苷酸的熔点
短于25bp的双链寡核苷酸:
tm = 2 (a + t) + 4 (g + c)
长于25bp的双链寡核苷酸:
tm = 81.5 + 16.6 ( lg[j+] ) + 0.41 (%gc)
– (600/n) – 0.63 (%formamide)
n —— 引物的长度(以碱基数计算)
j+ —— 单价阳离子浓度
(2.4) dna与表达蛋白之间分子量换算
1 kb dna = 333 amino acid ≈ 3.7 ′ 104 da
10,000 da protein ≈ 270 bp dna
30,000 da protein ≈ 810 bp dna
50,000 da protein ≈ 2701 bp dna
100,000 da protein ≈ 27 kb dna
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