培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。下面为您介绍培养基灭菌的几种方法解析:(1)化学消毒。
原理:药物与微生物细胞中的成分发生反应,使蛋白质变性酶失活。使用范围:器具、手、实验室、无菌室的灭菌,但不用于培养基的灭菌。
常用消毒剂:甲醛37%,戊二醛2%,高锰酸钾0.1%-0.25%,苯酚0.1%-0.15%,漂粉5%,过氧乙酸0.02%-0.2%,酒精75%,焦碳酸二乙酯0.01%-0.1%,煤酚皂(来苏)
(2)辐射灭菌。
辐射灭菌的原理是高能电磁辐射与细菌核酸发生光化学反应导致细菌死亡。常用的有紫外线,x射线,伽马射线。用于室内空气和器皿表面消毒。
(3)干热灭菌。
杀菌的原理是利用高温氧化微生物,使蛋白质变性,浓缩电解质杀死微生物。常用燃烧和电加热箱加热,140-180℃持续1-2小时。适用于玻璃和金属器皿及砂管的消毒。
(4)湿热灭菌。
杀菌的原理是直接用蒸汽杀菌,蒸汽冷凝时会释放出大量的潜热。蒸汽穿透力强,破坏细菌蛋白质与核酸的化学键,使酶失活,因代谢紊乱而杀死微生物。加水煮沸,常压灭菌:100℃。或者饱和蒸汽灭菌:一般121℃,30分钟。适用于培养基和发酵设备的灭菌。
(5)过滤灭菌。
杀菌的原理是用微生物不可渗透的膜来杀菌。方法是用0.01~0.45mm孔径的滤膜对压缩空气、酶溶液等耐热复合溶液进行灭菌。
在工业生产中,培养基、管道和设备的灭菌通常是通过蒸汽加热到一定温度并保温一段时间进行的,称为湿热灭菌。湿热灭菌的明显优点是使用方便、无污染,其冷凝水可直接冷凝在培养基中或通过管道排出。
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