Jurkat（Clone E6-1）细胞培养攻略
jurkat（clone e6-1）概述：
jurkat（clone e6-1）细胞，人t淋巴细胞白血病细胞，是肯德尔·史密斯博士将jurkat细胞在41°c孵育48h，于巨噬细胞上进行有限稀释克隆得到的，jurkat（clone e6-1）细胞是从14岁男性急性t细胞白血病患者的外周血建立的。在用佛波酯和针对t3抗原的凝集素或单克隆抗体刺激后产生大量的il-2（需要两种刺激物诱导il-2的产生）。可用于免疫系统疾病研究、免疫学和免疫肿瘤学研究，该细胞株克服了jurkat细胞系建立初期易被支原体污染的缺点。
图 jurkat细胞系谱
jurkat（clone e6-1）基本信息：
细胞形态
淋巴细胞样
生长特性
单个或成团，悬浮生长
生长培养基
rpmi-1640（abs9484）+10%fbs（abs972）+1%p/s（abs9244）
倍增时间
约20h
换液
每2-3天一次（具体时间取决于细胞密度）
冻存液
dmso:fbs:dmso=1:2:17
图 jurkat（clone e6-1）形态图
jurkat（clone e6-1）换液方法：
补液法：培养过程中发现培养基变黄，则补加适量的新鲜培养基（1-2ml左右），补充2-3次后，1200rpm （约250g）3min，全部离心，弃上清，将细胞沉淀重悬于新的培养基中；
半换液法：竖起培养瓶静置一段时间（10min左右），待细胞沉入底部，小心吸出约一半的培养基，转移到离心管离心，若有细胞沉淀，用少量培养基重选后再移入培养瓶，培养瓶瓶补充新鲜培养基；
注意：上述过程中若发现细胞密度超过1×106cells/ml则考虑换液，建议细胞密度保持在1×105-1×106cells/ml,细胞密度不可超过3×106/ml。
图 半换液示意图
培养要点：
1、该细胞受密度影响较大，低密度时细胞生长速度较慢，接种和培养时注意细胞密度；
2、clone e6-1复苏后有时需要5-7d才能恢复到冻存前的状态，前两天勿对其进行操作；
3、建议冻存密度提高到2-3×106/ml，冻存率可达到70%左右；
4、若发现较大细胞团，可用枪头轻微吹散，切勿用力过度，对其产生机械刺激。
jurkat（clone e6-1）的应用：
1、jurkat（clone e6-1）已被广泛用作tcr信号通路的遗传和生化分析的有力工具；
2、jurkat和jurkat（clone e6-1）都可用于成像研究，以确定超抗原特异性结合物中免疫突触（is）组装的关键；
图 e6.1 lfa-1high和raji细胞(apc)的15min缀合物进行免疫荧光分析
3、jurkat细胞模型已广泛应用于t细胞信号转导、细胞因子和受体的表达, 以及各类感染性疾病的治疗和机制研究中, 如hiv、eb、丙型肝炎等病毒的感染研究，其实验结果可作为人周围血淋巴细胞培养实验的基础研究和前期实验。
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*本文图片来源于网络，仅供学习参考用
参考文献
[1] cassioli c, balint s, compeer eb, et al. increasing lfa-1 expression enhances immune synapse architecture and t cell receptor signaling in jurkat e6.1 cells. front cell dev biol. 2021;9:673446. published 2021 jul 23. doi:10.3389/fcell.2021.673446
[2] chen jl, nong gm. [advances in application of jurkat cell model in research on infectious diseases]. zhongguo dang dai er ke za zhi. 2018 mar;20(3):236-242. chinese. doi: 10.7499/j.issn.1008-8830.2018.03.014. pmid: 29530126; pmcid: pmc7389782.
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[2] chen jl, nong gm. [advances in application of jurkat cell model in research on infectious diseases]. zhongguo dang dai er ke za zhi. 2018 mar;20(3):236-242. chinese. doi: 10.7499/j.issn.1008-8830.2018.03.014. pmid: 29530126; pmcid: pmc7389782.
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