霍乱弧菌的分离与鉴定
霍乱是一种古老且流行广泛的烈性传染病之一，属于检疫传染病，曾在世界上引起多次大流行。霍乱弧菌是该病的病原体，学名v.cholera，属弧菌科，是一种革兰氏阴性菌。
人类在自然情况下是霍乱弧菌的主要易感者，通过污染的水源或饮食物经口传染。在一定条件下，霍乱弧菌进入小肠后，依靠鞭毛的运动，穿过粘膜表面的粘液层，可能藉菌毛作用粘附于肠壁上皮细胞上，在肠粘膜表面迅速繁殖，经过短暂的潜伏期后便急骤发病。该菌不侵入肠上皮细胞和肠腺，也不侵入血流，仅在局部繁殖和产生霍乱肠毒素，此毒素作用于不粘膜上皮细胞与肠腺使肠液过度分泌，从而患者出现上吐下泻，泻出物呈“米泔水样”并含大量弧菌，此为本病典型的特征。
霍乱弧菌分离与鉴定方法
生化鉴定
生化鉴定前，先分离霍乱弧菌，通常情况下，霍乱弧菌在tcbs培养基上典型霍乱弧菌菌落为黄色，扁平，真径 2-3 mm；副溶血弧菌菌落呈圆形，边缘整齐、湿润、稍混浊、半透明，多数具尖心、斗笠状，蓝绿色菌落，直径2-4 mm。
但传统tcbs培养基上的其他的蔗糖发酵菌会影响tcbs琼脂上弧菌的鉴定，影响检测结果。或选用显色培养基分离，缔一生物为您*himedia公司（微生物公司）的hicrome弧菌显色培养基（货号：mv1682），在该培养基上细菌β-半乳糖苷酶和培养基中所包含底物发生反应，使霍乱弧菌呈现紫色菌落；同时可以分离出副溶血性弧菌，呈现蓝绿色菌落，可初步确认副溶血性弧菌和霍乱弧菌的存在。
可选用himedia公司hibio-idtm弧菌生化鉴定卡（货号：kb007），12种生化反应：
1
伏普试验
2
*脱羧试验
3
盐耐量试验（1%）
4
onpg试验
5
柠檬酸盐利用试验
6
*脱羧试验
7
*发酵试验
8
阿拉伯糖发酵试验
9
蔗糖发酵试验
10
葡萄糖发酵试验
11
水杨苷发酵试验
12
纤维二糖发酵试验
特点：
△操作简单，省时省力
△省心，所需试剂都包含在试剂盒中
△率，一次孵育即出结果
△实验结果准确、可靠
2.血清凝集法
根据弧菌o抗原不同，分成ⅵ个血清群，第ⅰ群包括霍乱弧菌的两个生物型。第ⅰ群a、b、c三种抗原成份可将霍乱弧菌分为三个血清型：含ac者为原型（又称稻叶型），含ab者为异型（又称小川型），a、b、c均有者称中间型（彦岛型）。
1992年10月在印度东南部又发现了一个引起霍乱流行的新血清型菌株（0139），它引起的霍乱在临床表现及传播方式上与古典型霍乱*相同，但不能被01群霍乱弧菌诊断血清所凝集，抗01群的抗血清对0139菌株无保护性免疫。在水中的存活时间较01群霍乱弧菌长，因而有可能成为引起世界性霍乱流行的新菌株。
3.核酸扩增法
核酸扩增两端，然后在体外模拟dna体内复制的过程反复扩增，使靶序列放大上万倍甚*百万倍而被检测出来。技术，即聚合酶链式反应（polymerase chainreaction，pcr），其基本原理是设计、合成两条寡核苷酸，作为引物，对应于待测病原微生物某一段特异性序列。
由霍乱弧菌引起的霍乱疾病，对人类健康危害很大，有效的检测鉴定出霍乱弧菌对人类健康有着重要意义。
缔一生物作为himedia公司在中国的代理商，在微生物培养和检测领域，一如既往地为您带来的服务。
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生化鉴定前，先分离霍乱弧菌，通常情况下，霍乱弧菌在tcbs培养基上典型霍乱弧菌菌落为黄色，扁平，真径 2-3 mm；副溶血弧菌菌落呈圆形，边缘整齐、湿润、稍混浊、半透明，多数具尖心、斗笠状，蓝绿色菌落，直径2-4 mm。
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1
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2
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5
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8
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9
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10
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11
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12
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特点：
△操作简单，省时省力
△省心，所需试剂都包含在试剂盒中
△率，一次孵育即出结果
△实验结果准确、可靠
2.血清凝集法
根据弧菌o抗原不同，分成ⅵ个血清群，第ⅰ群包括霍乱弧菌的两个生物型。第ⅰ群a、b、c三种抗原成份可将霍乱弧菌分为三个血清型：含ac者为原型（又称稻叶型），含ab者为异型（又称小川型），a、b、c均有者称中间型（彦岛型）。
1992年10月在印度东南部又发现了一个引起霍乱流行的新血清型菌株（0139），它引起的霍乱在临床表现及传播方式上与古典型霍乱*相同，但不能被01群霍乱弧菌诊断血清所凝集，抗01群的抗血清对0139菌株无保护性免疫。在水中的存活时间较01群霍乱弧菌长，因而有可能成为引起世界性霍乱流行的新菌株。
3.核酸扩增法
核酸扩增两端，然后在体外模拟dna体内复制的过程反复扩增，使靶序列放大上万倍甚*百万倍而被检测出来。技术，即聚合酶链式反应（polymerase chainreaction，pcr），其基本原理是设计、合成两条寡核苷酸，作为引物，对应于待测病原微生物某一段特异性序列。
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