微生物胱硫醚β-合酶(CBS)ELISA试剂盒双抗体夹心
微生物胱硫醚β-合酶(cbs)elisa试剂盒双抗体夹心法(检测未知抗原)
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。
4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的tmb底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5、终止反应：于各反应孔中加入2m硫酸0.05ml
6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测od值：在elisa检测仪上，于450nm(若以abts显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔od值，若大于规定的阴性对照od值的2.1倍，即为阳性。
elisa试剂盒需自备的设备及试剂
1. 450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2. 单道或多道微量加液器及吸头
3. 稀释样品的ep管
4. 蒸馏水或去离子水
5. 吸水纸
6. 盛放洗液的容器
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3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。
4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的tmb底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5、终止反应：于各反应孔中加入2m硫酸0.05ml
6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测od值：在elisa检测仪上，于450nm(若以abts显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔od值，若大于规定的阴性对照od值的2.1倍，即为阳性。
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1. 450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
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