Z小抑菌浓度测定试验（营养肉汤稀释法）
1 原 理
本试验将不同浓度的抑菌剂混合溶解于营养肉汤培养基中，然后接种细菌，通过细菌的生长与否，确定抑菌剂抑制受试菌生长的zui低浓度，即zui小抑菌浓度（mic）。本方法适用于溶出性抑菌产品zui低抑菌浓度的测定。
2 实验器材
（1）实验菌株 *（atcc 6538），大肠杆菌（8099或atcc 11229），可根据抑菌剂的用途，选择特定的菌株
（2）营养肉汤培养基
（3）稀释液
（4）吸管、试管
（5）37℃恒温培养箱。
3 操作步骤
（1）制备*、大肠杆菌悬液
（2）含抗菌剂培养基配制：将抗（抑）菌溶液用蒸馏水做对倍系列稀释成不同浓度的受试液，取各稀释度受试液 2.5ml 加入到含 2.5ml 双倍浓度营养肉汤的试管中。
（3）取 0.1ml 含菌量约为 108
cfu/ml 菌悬液接种于含抗（抑）菌剂的营养肉汤的试管中，作为试验组样本。
（4）以同样方法接种不含抗（抑）菌剂的营养肉汤的试管中，作为阳性对照组样本。
（5）取2支含营养肉汤的试管，作为阴性对照组样本。
（6）将试验组样本、阳性对照组样本及阴性对照组样本放置 37℃恒温培养箱中，培养 48h，观察结果。
（7）试验中应将试验用菌悬液进行活菌培养计数，其作用浓度应为 5×105cfu/ml～5×106cfu/ml。
4 评价规定
当阳性对照管有细菌生长（混浊），阴性对照管无菌生长（透明），试验用菌悬液的作用浓度为 5×105cfu/ml～5×106cfu/ml 时， 试验组无菌生长的zui高稀释度所对应的抗（抑）菌剂浓度，为该样品对受试菌的mic。
5 注意事项
接种时，应由低抗（抑）菌剂浓度向高浓度依次接种。
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3 操作步骤
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（2）含抗菌剂培养基配制：将抗（抑）菌溶液用蒸馏水做对倍系列稀释成不同浓度的受试液，取各稀释度受试液 2.5ml 加入到含 2.5ml 双倍浓度营养肉汤的试管中。
（3）取 0.1ml 含菌量约为 108
cfu/ml 菌悬液接种于含抗（抑）菌剂的营养肉汤的试管中，作为试验组样本。
（4）以同样方法接种不含抗（抑）菌剂的营养肉汤的试管中，作为阳性对照组样本。
（5）取2支含营养肉汤的试管，作为阴性对照组样本。
（6）将试验组样本、阳性对照组样本及阴性对照组样本放置 37℃恒温培养箱中，培养 48h，观察结果。
（7）试验中应将试验用菌悬液进行活菌培养计数，其作用浓度应为 5×105cfu/ml～5×106cfu/ml。
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当阳性对照管有细菌生长（混浊），阴性对照管无菌生长（透明），试验用菌悬液的作用浓度为 5×105cfu/ml～5×106cfu/ml 时， 试验组无菌生长的zui高稀释度所对应的抗（抑）菌剂浓度，为该样品对受试菌的mic。
5 注意事项
接种时，应由低抗（抑）菌剂浓度向高浓度依次接种。
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