赛默飞离子色谱法测定全血样品中的*
引言：*是一种水溶性b族维生素，在水溶液中以四价铵阳离子形式存在，是 正常代谢*的物质。准确分析全血样品中的*，对于代谢等生物领域 具有很重要的作用，是新型反应急性冠脉综合症的指标，在医学领域意义重 大。同时*（choline）作为一种营养食品添加剂，具有促进大脑的发育、改 善大脑的代谢、促进神经系统的信息传递、增强视力、改善钙的代谢等功能[1]。
国标中检测*的方法有gb/t 5413.20-1997《婴幼儿配方食品和乳粉 *的测定》[2]，该方法采用酶水解，分光光度法进行测定，成本高效率低。 近年来文献报道食品中*的测定方法为液相色谱法[3]和离子色谱法[4-6]，液相 色谱法一般采用蒸发光散射检测器进行检测，而此检测器非常用检测器，该 方法不易推广。离子色谱电导检测器检测灵敏度高，选择性好，易推广，在 食品检测方面应用较多，但是应用于全血样品中*的检测鲜有报道。血样 不同于常规的食品样品，不易分散。实验室采用曲那通-x100对血样进行分散 处理后，采用盐酸水解，离子色谱进行检测。方法简单易行，准确可靠，实 验结果满足检测的要求。
测试条件：
仪器和试剂
赛默飞ics-3000离子色谱系统（美国dionex公司），电导 检测器；自动进样器及chromeleon色谱数据处理工作 站；miliq-element纯水机（法国millipore）；kq-500e型 *（昆山市超声仪器有限公司）；电热恒温水 浴锅（北京长安科学仪器厂）；0.22 µm尼龙滤膜。 *酒石酸氢盐（纯度98.0%，日本tci试剂） ； miliq-element超纯水；盐酸（优级纯，北京化工厂）；曲 拉通x-100（化学纯，西陇化工股份有限公司）；甲烷磺 酸（色谱纯，sigma公司）。文中所用血样为鸡血样品。
色谱条件
色谱柱：ionpac cs12分析柱 （250 mm×4 mm）和 ionpac cg12保护柱（50 mm×4 mm）； 淋洗液：甲烷磺酸（16 mmol/l）； 抑制器：csrs 300 4 mm ，外接水抑制模式。 进样体积：100 µl。
样品前处理方法：
准确称取约2 g全血样品（真空采样，保存于4 ℃ 冰箱中可保持30天）于50 ml具塞玻璃锥形瓶中，加入 27.5 ml 1.0%的曲拉通-x100溶液，超声15 min，再加 入1.5 ml盐酸，加盖，混匀。将锥形瓶放入70 ℃水浴 3小时，每小时摇一次。将水解产物冷却至室温，用水 冲洗锥形瓶，所得溶液过滤至容量瓶中，将滤液定容至 100 ml，此滤液可以在4 ℃下保存三天。分析前用水继续 稀释此滤液10倍后，过0.22 µm尼龙滤膜。同时准备试剂 空白。
结果和讨论：
前处理条件的选择
血样不同于粉末的食品样品，凝固后很难在水溶液中 均匀分散，会大大的影响提取效率。实验室采用了0.5 % 曲拉通x-100溶液（一种表面活性剂）对血样进行分散， 并且采用超声提取以提高提取率。实验室考察了超声时 间（15 min、30 min、45 min、60 min）对提取效率的影 响，从图1可以明显的看出，当超声时间达到15 min后， 提取率就没有明显的变化，因此实验室选择15 min作为超 声时间。
同时也考察了水解溶液中盐酸的用量，选择某血 样，研究采用不同的盐酸溶液配是否会影响血样的水解 效率，不同的盐酸配比条件采用实验室建立的方法进行 检测，所得结果见表1。 方法1盐酸用量越大，所得滤液酸度较高，若直接 进样会使阳离子交换官能团发生质子化，色谱峰严重变 形，因此必须再稀释5倍后再进样。而采用方法2和方法 3进行前处理，所得滤液酸度就适合直接进样分析，且已 经满足了水解的效果。方法3稀释倍数增大一倍，样液 中*的含量也能达到检出限的要求，且溶液更容易过 滤，可以进一步提高工作效率，所以实验室采用了方法3 的盐酸用量进行前处理。
色谱柱的选择
在常用的阳离子色谱柱中，ionpac cs17色谱柱同 样可以分析血样中的*，淋洗液浓度为6 mm的甲烷磺 酸，对于ionpac cs17色谱柱分析奶粉中的*色谱峰 对称性更好，所用淋洗液浓度低。但钠离子、铵离子和 钾离子的分离度不好，并且ionpac cs17更容易发生阳 离子交换官能团的质子化现象，与ionpac cs12a色谱柱 相比，前处理后的溶液需要多稀释5倍后进样。可能会 影响含量较低的血样的定量。所以实验室采用了ionpac cs12a作为检测用色谱柱，等度淋洗。对于分离效果较 好的新的色谱柱来说，淋洗液的浓度不超过20 mmol/l 均能满足分离的要求。由于血样中成分较为复杂，钾含 量较高，如果淋洗液浓度太高，钾离子拖尾现象比较严 重，所以终采用了16 mmol/l作为淋洗液条件
结论：
本方法采用盐酸酸解，使全血样品中的*释放出 来，前处理方法对*提取效率高。处理后的样品溶液 使用ionpac cs12a色谱柱分析，抑制电导检测，*色 谱峰型良好，检测灵敏度高，且可以同时测定其他5种常 见阳离子。
一种先进的空气质量监测设备，有助于提高环境意识
格力博80V-CSF401电链锯产品的特点简介细节和使用方法
解读气动元件的临界压力比
德国皮尔兹Pilz安全继电器使用要点说明
上海百试绝缘电阻测试仪输出功率大，短路电流值高
赛默飞离子色谱法测定全血样品中的*
操作需谨慎！电动伺服拉床操作时需要注意这些
锌达铖冲孔机厂家详细说明爬架冲孔机具体内容
怎样选择药用喷雾干燥机
自动上水、自动送面的真空和面机为大型全自动真空和面机带来了质的变化
生猪打毛机说明
cnc数控车床的液压动力站你了解多少？
如何选择信号输出电子秤
9个关于Discovery同步热分析仪的小优点
VPPM-6L-L-1-G18-0L6H-A4P
一体化蒸馏仪的操作指导
详细解析影响破裂强度试验机报价的几个主要因素，帮助用户更好地理解市场价
PIR保冷管壳的保冷原理及优势
磁性排屑机与链板排屑机的本质区别
如何防止小区污水处理设备遭遇管道堵塞
国标中检测*的方法有gb/t 5413.20-1997《婴幼儿配方食品和乳粉 *的测定》[2]，该方法采用酶水解，分光光度法进行测定，成本高效率低。 近年来文献报道食品中*的测定方法为液相色谱法[3]和离子色谱法[4-6]，液相 色谱法一般采用蒸发光散射检测器进行检测，而此检测器非常用检测器，该 方法不易推广。离子色谱电导检测器检测灵敏度高，选择性好，易推广，在 食品检测方面应用较多，但是应用于全血样品中*的检测鲜有报道。血样 不同于常规的食品样品，不易分散。实验室采用曲那通-x100对血样进行分散 处理后，采用盐酸水解，离子色谱进行检测。方法简单易行，准确可靠，实 验结果满足检测的要求。
测试条件：
仪器和试剂
赛默飞ics-3000离子色谱系统（美国dionex公司），电导 检测器；自动进样器及chromeleon色谱数据处理工作 站；miliq-element纯水机（法国millipore）；kq-500e型 *（昆山市超声仪器有限公司）；电热恒温水 浴锅（北京长安科学仪器厂）；0.22 µm尼龙滤膜。 *酒石酸氢盐（纯度98.0%，日本tci试剂） ； miliq-element超纯水；盐酸（优级纯，北京化工厂）；曲 拉通x-100（化学纯，西陇化工股份有限公司）；甲烷磺 酸（色谱纯，sigma公司）。文中所用血样为鸡血样品。
色谱条件
色谱柱：ionpac cs12分析柱 （250 mm×4 mm）和 ionpac cg12保护柱（50 mm×4 mm）； 淋洗液：甲烷磺酸（16 mmol/l）； 抑制器：csrs 300 4 mm ，外接水抑制模式。 进样体积：100 µl。
样品前处理方法：
准确称取约2 g全血样品（真空采样，保存于4 ℃ 冰箱中可保持30天）于50 ml具塞玻璃锥形瓶中，加入 27.5 ml 1.0%的曲拉通-x100溶液，超声15 min，再加 入1.5 ml盐酸，加盖，混匀。将锥形瓶放入70 ℃水浴 3小时，每小时摇一次。将水解产物冷却至室温，用水 冲洗锥形瓶，所得溶液过滤至容量瓶中，将滤液定容至 100 ml，此滤液可以在4 ℃下保存三天。分析前用水继续 稀释此滤液10倍后，过0.22 µm尼龙滤膜。同时准备试剂 空白。
结果和讨论：
前处理条件的选择
血样不同于粉末的食品样品，凝固后很难在水溶液中 均匀分散，会大大的影响提取效率。实验室采用了0.5 % 曲拉通x-100溶液（一种表面活性剂）对血样进行分散， 并且采用超声提取以提高提取率。实验室考察了超声时 间（15 min、30 min、45 min、60 min）对提取效率的影 响，从图1可以明显的看出，当超声时间达到15 min后， 提取率就没有明显的变化，因此实验室选择15 min作为超 声时间。
同时也考察了水解溶液中盐酸的用量，选择某血 样，研究采用不同的盐酸溶液配是否会影响血样的水解 效率，不同的盐酸配比条件采用实验室建立的方法进行 检测，所得结果见表1。 方法1盐酸用量越大，所得滤液酸度较高，若直接 进样会使阳离子交换官能团发生质子化，色谱峰严重变 形，因此必须再稀释5倍后再进样。而采用方法2和方法 3进行前处理，所得滤液酸度就适合直接进样分析，且已 经满足了水解的效果。方法3稀释倍数增大一倍，样液 中*的含量也能达到检出限的要求，且溶液更容易过 滤，可以进一步提高工作效率，所以实验室采用了方法3 的盐酸用量进行前处理。
色谱柱的选择
在常用的阳离子色谱柱中，ionpac cs17色谱柱同 样可以分析血样中的*，淋洗液浓度为6 mm的甲烷磺 酸，对于ionpac cs17色谱柱分析奶粉中的*色谱峰 对称性更好，所用淋洗液浓度低。但钠离子、铵离子和 钾离子的分离度不好，并且ionpac cs17更容易发生阳 离子交换官能团的质子化现象，与ionpac cs12a色谱柱 相比，前处理后的溶液需要多稀释5倍后进样。可能会 影响含量较低的血样的定量。所以实验室采用了ionpac cs12a作为检测用色谱柱，等度淋洗。对于分离效果较 好的新的色谱柱来说，淋洗液的浓度不超过20 mmol/l 均能满足分离的要求。由于血样中成分较为复杂，钾含 量较高，如果淋洗液浓度太高，钾离子拖尾现象比较严 重，所以终采用了16 mmol/l作为淋洗液条件
结论：
本方法采用盐酸酸解，使全血样品中的*释放出 来，前处理方法对*提取效率高。处理后的样品溶液 使用ionpac cs12a色谱柱分析，抑制电导检测，*色 谱峰型良好，检测灵敏度高，且可以同时测定其他5种常 见阳离子。
一种先进的空气质量监测设备，有助于提高环境意识
格力博80V-CSF401电链锯产品的特点简介细节和使用方法
解读气动元件的临界压力比
德国皮尔兹Pilz安全继电器使用要点说明
上海百试绝缘电阻测试仪输出功率大，短路电流值高
赛默飞离子色谱法测定全血样品中的*
操作需谨慎！电动伺服拉床操作时需要注意这些
锌达铖冲孔机厂家详细说明爬架冲孔机具体内容
怎样选择药用喷雾干燥机
自动上水、自动送面的真空和面机为大型全自动真空和面机带来了质的变化
生猪打毛机说明
cnc数控车床的液压动力站你了解多少？
如何选择信号输出电子秤
9个关于Discovery同步热分析仪的小优点
VPPM-6L-L-1-G18-0L6H-A4P
一体化蒸馏仪的操作指导
详细解析影响破裂强度试验机报价的几个主要因素，帮助用户更好地理解市场价
PIR保冷管壳的保冷原理及优势
磁性排屑机与链板排屑机的本质区别
如何防止小区污水处理设备遭遇管道堵塞