液氮罐之种子保存
液氮罐是超低温保存方法之一，能够达到零下196度的温度作者：液氮罐
2018-02-22 14:48:18
分类：政策法规
标签：液氮罐
阅读（158）评论（0）点赞（0）种质资源库的液氮罐低温建设方法探讨
种子资源整体建设*保存，是减少外部环境破坏利用人工条件*保存种质资源的方法。，主要包括种子低温保存，超低温保存等*新前沿保存方法。利用液氮罐的种质资源保存是当今**的种质资源保存方法。也是*科学的保存方法。
液氮罐是超低温保存方法之一，能够达到零下196度的温度，是*保存种子的方法。这种方法是将种质材料(包括种子、组织体等)保存在-196℃的液氮环境中，让种子生命休眠并保存生命活力在极低的温度下，在液氮(-196℃)温度下，任何的细胞生长都能够*的休眠停止，这也是认为目前为止的作为植物种子休眠保存的*好办法。节省资源节省人力物力。
这是一种整套技术，能够把物种温度变温到零下196度下并*保存*休眠，使其能够保存其生命活力，待使用时能够恢复其细胞生命力的技术方法。
一般来说，它包括以下6个步骤:
(1)前培养:对培养体短期的生长锻炼处理，使其提高耐液氮保存的能力。
(2)防冻:培养体放入防冻液中，使其细胞降低冰点，减少因形成冰晶可能造成的损伤。
(3)变温冷冻:按照不同变温模式降温冷冻，降温速度依不同种质材料采用特定的速度。
(4)超低温保存:将冷冻材料保存到有效低温环境中，以防止冰的游移或解体。
(5)解冻：一般认为快速解冻更好。从液氮环境中取出封装好的材料，与其容器一同放入+40℃的无菌水浴中，直到解冻后才回到室温下，未封装的材料放到20～30℃的液体培养基中解冻。
(6)生命力测定:如用ttc染色法等。
种子材料的超低温保存，传统的技术有干冻法、预冻法和两步法，上世纪80年代末和90个代初玻璃化法和包埋脱水法开始应用于植物材料的超低温保存。
干冻法:利用无菌空气流、干燥硅胶或饱和溶液表面的气相等对种质材料进行脱水处理，然后快速将其投入液氮贮存。
预冻法:将种质材料在添加保护剂(如蔗糖、二甲亚砜、甘油等)后置于低温冰箱或液氮蒸汽箱(-10～-70℃)中冰冻若干小时后投入液氮贮存。
两步法:种质材料在添加保护剂后，用程序降温仪以某个速率(每分钟0.1～0.5℃)降温至转移温度(-40～-70℃)，然后投入液氮中贮存，两步法较预冻法更为严格。
玻璃化法:种质材料用高浓度的复合冰冻保护剂处理后，快速投入液氮贮存，细胞直接用*浓度的保护剂脱水，在快速降温时胞内胞外都进入玻璃化态，而不形成冰晶，从而避免了细胞结构的破坏。包埋脱水法:茎尖、分生组织和体细胞胚等种质材料用褐藻酸钙包埋后，阶段先在含高浓度蔗糖的培养基中脱水，第二步使用无菌空气为其脱水，放入液氮罐*保存
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2018-02-22 14:48:18
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这是一种整套技术，能够把物种温度变温到零下196度下并*保存*休眠，使其能够保存其生命活力，待使用时能够恢复其细胞生命力的技术方法。
一般来说，它包括以下6个步骤:
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(2)防冻:培养体放入防冻液中，使其细胞降低冰点，减少因形成冰晶可能造成的损伤。
(3)变温冷冻:按照不同变温模式降温冷冻，降温速度依不同种质材料采用特定的速度。
(4)超低温保存:将冷冻材料保存到有效低温环境中，以防止冰的游移或解体。
(5)解冻：一般认为快速解冻更好。从液氮环境中取出封装好的材料，与其容器一同放入+40℃的无菌水浴中，直到解冻后才回到室温下，未封装的材料放到20～30℃的液体培养基中解冻。
(6)生命力测定:如用ttc染色法等。
种子材料的超低温保存，传统的技术有干冻法、预冻法和两步法，上世纪80年代末和90个代初玻璃化法和包埋脱水法开始应用于植物材料的超低温保存。
干冻法:利用无菌空气流、干燥硅胶或饱和溶液表面的气相等对种质材料进行脱水处理，然后快速将其投入液氮贮存。
预冻法:将种质材料在添加保护剂(如蔗糖、二甲亚砜、甘油等)后置于低温冰箱或液氮蒸汽箱(-10～-70℃)中冰冻若干小时后投入液氮贮存。
两步法:种质材料在添加保护剂后，用程序降温仪以某个速率(每分钟0.1～0.5℃)降温至转移温度(-40～-70℃)，然后投入液氮中贮存，两步法较预冻法更为严格。
玻璃化法:种质材料用高浓度的复合冰冻保护剂处理后，快速投入液氮贮存，细胞直接用*浓度的保护剂脱水，在快速降温时胞内胞外都进入玻璃化态，而不形成冰晶，从而避免了细胞结构的破坏。包埋脱水法:茎尖、分生组织和体细胞胚等种质材料用褐藻酸钙包埋后，阶段先在含高浓度蔗糖的培养基中脱水，第二步使用无菌空气为其脱水，放入液氮罐*保存
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