口蹄疫O型抗体检测试剂盒（酶联免疫法） 说明书
通用名：口蹄疫o型抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
英文名：test kit for antibodies to foot and mouth disease virus asia o（elisa）
【包装规格】 96t×1/盒、96t×2/盒、96t×5/盒
【预期用途】 口蹄疫是由口蹄疫病毒（foot and mouth disease virus，fmdv）引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病，其特征为口腔黏膜、蹄部、乳房皮肤发生水泡和烂斑。
本试剂用于检测牛、羊、猪血清中口蹄疫o型抗体，可用于口蹄疫o型疫苗免疫效果评价。
【原 理】
本试剂盒由预包被口蹄疫o型抗体的酶标板、抗体工作液、抗原液、酶标记物及其他配套试剂组成，应用阻断酶联免疫法（elisa）原理检测牛、羊、猪血清样本中口蹄疫o型抗体。实验时将稀释的样本与抗原液同时加入酶标板中孵育，样本中的抗体与酶标板上的抗体竞争抗原，阻断抗原与板的结合；经洗涤后，再加抗体工作液孵育；经洗涤后加入酶标记物孵育；再经洗涤除去未结合的酶标记物，在孔中加底物液，与酶标结合物反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成负相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有口蹄疫o型抗体。
【试剂盒组成】
序号
名称
规格/96t×1
规格/96t×2
规格/96t×5
1
酶标记物
6ml×1(红盖)
11ml×1(红盖)
26ml×1(红盖)
2
抗体工作液
6ml×1(蓝盖)
11ml×1(蓝盖)
26ml×1(蓝盖)
3
抗原液
6ml×1(黑盖)
11ml×1(黑盖)
26ml×1(黑盖)
4
20x浓缩洗涤液
40ml×1(白盖)
40ml×2(白盖)
200ml×1(白盖)
5
底物液a
6ml×1(白盖)
11ml×1(白盖)
26ml×1(白盖)
6
底物液b
6ml×1(黑盖)
11ml×1(棕盖)
26ml×1(黑盖)
7
终止液
6ml×1(黄盖)
11ml×1(黄盖)
26ml×1(黄盖)
8
阳性对照
1.0 ml×1(红盖)
1.5 ml×1(红盖)
2.0 ml×1(红盖)
9
阴性对照
1.0 ml×1(绿盖)
1.5 ml×1(绿盖)
2.0 ml×1(绿盖)
10
酶标板
96t×1
96t×2
96t×5
11
盖板膜
1
2
5
12
自封袋
1
1
2
13
说明书
1
1
1
14
稀释板
1
2
5
【储存及有效期】 2～8℃保存，有效期12个月。
包被板开封后请于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限为2个月。
【适用仪器】 含450nm、630nm波长的酶标仪，37℃恒温设备，可调微量移液器。
【样品准备】
1.取动物全血按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血、无污染。样品1周内可于2～8℃保存，长期需置-20℃保存。
2.用工作洗涤液将待检牛、羊血清先按32倍稀释（如5μl血清加入155μl工作洗涤液中，混匀），待检猪血清按16倍稀释（如5μl血清加入75μl洗涤液中，混匀），阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解，然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释成工作洗涤液(如19份蒸馏水或去离子水+1份浓缩洗涤液)。
【检验方法】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条，设阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
3.阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照50μl，样品孔每孔先加入工作洗涤液25μl，再加入稀释后的样品25μl；最后都加入抗原液50μl。
注：加入抗原后牛、羊样本稀释比例相当于1:128，猪样本稀释比例相当于1:64。
4.震荡混匀10秒，盖好盖板膜，置37℃（推荐水浴）避光反应30分钟。
5.甩去孔内液体，每孔加350μl工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，最后一次拍干。
6.每孔加抗体工作液50μl，盖好盖板膜，置37℃避光反应30分钟。
7.洗涤，同步骤5。
8.每孔加酶标记物50μl，盖好盖板膜，置37℃避光反应30分钟。
9.洗涤，同步骤5。
10.每孔依次加底物液a、底物液b各50μl，混匀，盖好盖板膜，置37℃避光反应15分钟
11.每孔加终止液50μl，混匀，于450nm(可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值（a值）。
【参考值】 实验正常的情况下，阴性对照a值≥0.8，阳性对照a值≤50%×阴性对照a值。
【检验结果的解释】
1.pi（阻断率）=（1- 阴性对照平均a值(样本a值)）×100%，pi≥50%为阳性；pi＜50%为阴性。
2.本实验检测牛、羊血清结果为阳性时表明待检样本中含有口蹄疫o型抗体，且效价高于1:128，达到保护水平；反之检测结果为阴性时表明待检样本中不含有口蹄疫o型抗体，或效价低于1:128，未达到充足保护水平。
3.本实验检测猪血清结果为阳性时表明待检样本中含有口蹄疫o型抗体，且效价高于1:64，达到保护水平；反之检测结果为阴性时表明待检样本中不含有口蹄疫o型抗体，或效价低于1:64，未达到充足保护水平。
4.如需了解样本抗体的最终效价，可将样本进行梯度稀释，使pi≥50%的最高稀释比例即为该样本抗体的最终效价。
【试验方法的局限性】
该试验仅作为定性牛、羊、猪血清中口蹄疫o型抗体，根据pi值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。
该试剂盒不适用于合成肽疫苗免疫抗体效价评估。
【注意事项】
1.实验操作时需戴手套、穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度，各种实验废弃物都应按传染物处理。
2.终止液具有腐蚀性，应避免接触皮肤和衣物，如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。
3.酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋，未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。
4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶，使用时需恢复至室温以wan全溶解。
5.洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。
6.用于检测的样品应保持新鲜。
7.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。
8.不同批号试剂组分不得混用。
关键词：酶标仪 恒温设备 移液器
薄膜检测仪器有哪些
液氮恒温器（电学）T9015的技术规格
食品级高温隔膜泵工作原理
FS201-300氢气发生器操作方法
HXF7带接管阻火单呼阀HX7的制造标准
口蹄疫O型抗体检测试剂盒（酶联免疫法） 说明书
德国进口宝德BURKERT0020293安装方式
不锈钢气体减压阀YK43F先导活塞式减压阀YK43X高压气体减压阀特点
砝码，无磁不锈钢砝码，锁形砝码准确度等级说明
高速剪板机优势分析
多种类滑触线轨道平直度偏差要及时进行处理
液压打包机现场实拍图片 结构
智慧城市从不缺少幻想 什么技术足以支撑未来？
实验室真空烘箱关于温度的操作要点
六六视觉YZ-5E YZ5CS1*灯泡12V50W的规格?
定制XRD原位热台适配X射线衍射仪进行现场测试
淀粉机可适用于：马铃薯、红薯、芭蕉芋、木薯、葛根、莲藕等淀粉生产
拉力试验机更换传感器需要重新厂家校正
30t/d医院污水处理设备一体机
曲靖金库门,曲靖大型金库门生产厂家