你知道RNA提取的实验步骤是什么吗？
rna是目前发现细胞内生物功能zui丰富多样的生物大分子，同时是dna与蛋白质信息传递的桥梁，因此完整rna的提取和纯化是功能基因组时代的重要手段，那么你知道rna提取的实验步骤是什么吗？让我们一起来看看吧！
以trizol法提取组织细胞为例：
1.提取细胞rna时，先离心沉淀细胞，每5~106个细胞加1ml trizol后，反复用枪吹打或剧烈震荡以裂解细胞；
2.将上述组织或细胞的trizol裂解液转入ep管中，在室温15~30℃下放置5分钟；
3.在上述ep管中，按照每1ml trizol后加0.2ml氯仿的量加入氯仿，盖上ep管盖子，在手中用力震荡15秒，在室温下（15~30℃）放置2~3分钟后，12000g（2~8℃）离心15分钟；
4.去上层水相置于新ep管中，按照每1ml trizol加0.5ml异丙醇的量加入异丙醇，在室温下（15~30℃）放置10分钟后，12000g（2~8℃）离心10分钟；
5.弃上清，按照每1ml trizol加1ml 75% 乙醇进行洗涤，涡旋混合，7500g（2~8℃）离心5分钟，弃上清；
6.让沉淀的rna在室温在自然干燥；
7.用rnase-free water 溶解rna沉淀。
8.rna检测
(1) rna的电泳图谱，电泳的目的是在于检测28s、18s、5s条带的完整性和他们的比值，一般的，如果28s和18s条带明亮、清晰、条带锐利，并且28s的亮度在18s条带的两倍以上，我们认为rna的质量是好的。
(2) 测定样品在260nm和280nm的吸光值按1od=40μg/ml rna计算rna的产量，一般的od260/od280在1.8-2.0范围，我们认为rna的质量是好的，如果r<1.8，说明溶液中蛋白或者时其他有机物的污染比较明显，如果r>2.2，说明rna已经水解成单核酸了。
更多有关rna提取的实验步骤，请联系北京百奥创新科技有限公司：
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