操作过程的控制:
⑴ 严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30~60min。
⑵ 加样后及时放人孵箱。标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。
(3)封板温育时,各孔一定要封严,防止阳性标本的液体蒸发,产生周边现象从而导致“花板”的出现。
(4)用洗板机洗板时,保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干:还要防止针口有纤维蛋白或异物,这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板”的出现。
(5)合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
(6)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
(7)显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的tmb显色剂不用。
(8)加样时保持显色剂不外流;a、b液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。
(9)应保证c清洁,整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。人elisa试剂盒以上的措施可以使“花板”降至zui低限度。从而提高检测的特异性。并得到更准确、可靠的实验结果。
人elisa试剂盒的主要组成成份是什么呢?根据elisa试剂盒的应用范围,可将elisa试剂盒分为拿几种呢?
完整的elisa试剂盒主要的组成成份如下:
(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
(2)c的抗原或抗体(结合物);
(3)酶的底物;
(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);
(5)结合物及标本的稀释液;
(6)洗涤液,在板式人elisa试剂盒中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;
(7)酶反应终止液,常用的hrp反应终止液为硫酸,其浓度按加量及比色液的zui终体积而异,在板式elisa中一般采用2mol/l。
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