简单了解鼠抗T2-毒素单克隆抗体的常见问题
鼠抗t2-毒素单克隆抗体是由多种镰刀菌产生的一种霉菌毒素。主要污染小麦、大麦、玉米等粮食作物及其制品，对人类健康及畜牧业构成了较大危害。t2-毒素主要影响血液，肝脏，肾脏，胰腺肌肉及淋巴细胞的功能，t2-毒素中毒后的一般临床症状为厌食、呕吐、腹泻、生长停滞、繁殖和神经机能障碍等。该抗体可运用于elisa、胶体金、免疫亲和柱层析等免疫检测。鼠抗t2-毒素单克隆抗体的常见问题：
1.包被抗体或抗原不适，易产生阳性值较小，或产生变异，即跳管现象。
2.用抗血清不纯化，或纯化程度太低的抗体包被，则阳性值较小，或没有阳性梯度。
3.封闭不好或标记物过浓可产生对照值较高。
制备并鉴定抗t-2毒素单克隆抗体杂交瘤细胞株，以期为t-2毒素的快速检测提供有力的抗体工具。方法：采用琥珀酸酐法将t-2毒素活化为t-2hs,t-2hs在dcc与nhs作用下与牛血清白蛋白(bsa)或卵清白蛋白(ova)偶联合成*抗原。以t-2hs-bsa为抗原，免疫balb/c小鼠，用elisa筛选、建立分泌抗t-2毒素抗体的杂交瘤细胞株。测定单抗免疫球蛋白亚类及单抗效价，用间接竞争法检测单克隆抗体细胞株的特异性。结果：建立了1株稳定分泌抗t-2毒素抗体的杂交瘤细胞株t-1b3，该细胞株所分泌的单隆抗体ig亚类为igg1，elisa检测结果表明抗t-2毒素抗体可以与t-2毒素发生特异性反应，工作浓度为1:6.5×104,ic50为3.6ng/ml。该抗体与ht-2毒素的交叉反应为65.9%,与黄曲霉毒素无交叉。结论：制备出能分泌具有较高特异性和亲和力的抗t-2毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。
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