labchip gxii touch为生物治疗药物流程各个环节提供快速定量和样品质控。例如,自动化的表征检测使用户可以更快地获得多个关键的质量属性。如今, 研究者们可在研发流程的更早期筛选出具备最佳指征的蛋白,并将“质量源于设计”的理念整合到生物治疗药物开发流程中(图 5)。
小规模高通量工艺开发
工艺参数
纯化和样品制备
janus biotx pro
工作站
关键质量属性的测定
信息学
工艺结果
图 5. 利用 labchip 微流体技术和 janus@bio tx工作站, 您可以一天内完成使用其他方法通常需要几周才能完成的样品纯化和分析。探索更广泛的实验条件,节约您的生物治疗药物研发时间和成本(如上图)。labchip touch 试剂可用千多种蛋白属性分析,包括标准和皮克级的蛋白质(图 6)。
图 6. 标准和皮克级灵敏度的蛋白质检测实验
lachip gxii touch在 aav衣壳蛋白分析中,提高了aav纯度分析的速度、通量和数据质量。 aav衣壳由三种病毒蛋白(vp1、vp2 和 vp3)组成,其比例、鉴别、纯度影响药物效能和效价强度,需要被鉴定并监控以确保药物质量。利用 sds存在下的微流控毛细管电泳技术分离 aav衣壳蛋白,并测定每种病毒衣壳蛋白的大小和浓度。labchip® gxii touchtm 系统的proteinexacttm 试剂采用系统校准步骤,可实现高精度重现性,并具有更高的灵敏度和较宽的分析范围。65秒内即可完成样品分析。这种高通量的分析方法可以同时测定 96份 aav样品,并提供传统毛细管电泳可比结果(图 7)。
图 7. aav8 变性后衣壳蛋白labchip电泳图祥品重现性好
aav动力学观察实验的应用:labchiptm gxii touchtm 蛋白鉴定系统能够在 30-50秒内收集多达 300个实验点,这可能为衣壳蛋白提供额外的信息。部分变性衣壳可由不同蛋白质分子量(单体、二聚体、三聚体等)的混合物组成,如图 8所示。在实验期间。在1%sds 和 te缓冲液中加入 aav样品的 96孔板被加热到特定的温度进行变性,随后进行检测。
图 8a和 8b:动力学实验中部分变性的 aav8 (图 8b—只显示二聚体)
labchip® gxii touchtm 蛋白分析系统平台提供 aav 衣壳蛋白的全面分析的能力。该方法为 aav衣壳蛋白鉴定提供了一种决速、高通量、稳定可靠的方法。高重现性和准确的衣壳成分检测可以作为重组 aav病毒颗粒表征的新方法,是基因治疗应用的关键一步。
labchip® gxii touch 抗体表征应用
图 9 展示了浓度为 1mg/ml的非还原mab的电泳图谱示例。左侧插图可见低含量片段,例如轻链、重链、重-轻链、重-重链、重-重-轻链和完整 mab均实现良好分离。还原 mab的电泳图谱如图 10所示,图中可见非糖基化重链(nghc)与重链之间具有足够的分辨率,可进行准确定量。
图 9. 非还原mab电泳图,显示有片段和完整mab的%纯度。位于大约 17.5 秒处标记为 x 的峰是加入抗体中用作内标物的溶菌酶。lm是内标,xsys是系峰。
图 10. 还原 mab 电泳图谱
工作原理
labchip电泳在小型微流体芯片上进行。分析之前, 将试剂装载到芯片的各个孔中。这些孔与蚀刻有微小通道的石英片基相连, 每个微通道仅有人的发丝 粗细(图 11)。
将芯片装入 labchip gxii touch 系统后, 芯片孔与铂 电极接触, 由铂电极提供电压和电流控制。系统机 楲臂将微孔板上的样品孔直接移动到芯片毛细管 “吸管”下方, 大约 150nl 样品被抽吸到芯片上。 样品染色和脱色由系统平台自动完成。
待分析样品逐一被电泳分离, 然后通过激光诱导的 荧光检测样品条带。通过 ladder 和内标确定各条带 的大小和浓度。在各样品分析之间清洗吸管, 从而 消除了交叉污染或残留。
图 11. 蛋白质研究用的 labchip
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