ELISA试剂盒需把握的关键有哪些?

elisa实验的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记,其中,结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。进行检测时,样品中的受检物质(抗原或抗体)与固定的抗体或抗原结合。通过洗板除去非结合物,再加入酶标记的抗原或抗体,此时,能固定下来的酶量与样品中被检物质的量相关。通过加入与酶反应的底物后显色,根据颜色的深浅可以判断样品中物质的含量,进行定性或定量的分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的灵敏度。
那么elisa试剂盒需把握的关键有哪些?
1.在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。一切试剂瓶盖须盖紧以避免蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致呈现错误的结果。
2.小心汲取试剂并严格遵守给定的孵育时刻和温度。请注意在汲取标本/规范品,酶结合物或底物时,di一个孔与一个孔加样之间的时刻距离假如太大,将会导致不同的 “预孵育”时刻,然后明显地影响到测量值的准确性及重复性。
3.试剂盒保存:部分试剂保存于-20℃,部分试剂保存于2-8℃,具体以标签上的标示为准。
4.浓洗涤液会有盐分出,稀释时可在水浴中加温助溶。
5.刚敞开的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对试验结果造成任何影响。
6.一切的样品都应管理好,依照规则的程序处理样品和检测设备。

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