基本知识
1. 液体培养基贮存于4 oc 冰箱,避免光照,实验进行前放在37度水槽中温热。
2. 液体培养基(加血清) 存放期为六个月,期间glutamine 可能会分解,若细胞生长不佳,可以再添加适量glutamine。
配制参数
粉末培养基配制(以1 升为例):
1. 细胞培养基通常须添加10 % 血清,因此粉末培养基之配制体积为900 ml,ph 为 7.2 - 7.4。nahco3 为另外添加,若将nahco3 粉末直接加入液体培养基中会造成 ph 之误差,或局部过碱。因此粉末培养基及nahco3 粉末应分别溶解后才混合,然后用co2 气体调整ph,而非用强酸(hcl)或强碱(naoh),因为氯离子对细胞生长可能有影响,且贮存时培养基的ph 易发生改变。
2. 材料:
2.1. 纯水(milli-q 水或二次至三次蒸馏水,水品质非常重要)
2.2 粉末培养基
2.3 nahco3 (sigma s-4019)
2.4 电磁搅拌器
2.5 无菌血清瓶
2.6. 0.1 或0.2 mm无菌过滤膜
2.7. ph meter
2.8. 真空帮浦
2.9. co2 气体
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