种子扩大培养的目的与要求
工业化大规模生产所需要的菌体数量较多,为满足工业化生产需求,必须逐扩大培养规模,增加菌体数量。同时,在逐步增殖过程中,应通过培养基组成和环境的调控,提升菌种的生产性能,使生产高效进行。
不同产品、不同菌种和不同生产工艺所对应的扩大培养工艺流程不同。菌种扩大培养的目的是高效生产优质产品。菌种扩大培养对环境、设备和流程的要求都以这目的为出发点。
1、种子扩大培养的目的
种子扩大培养是指将保存在沙土管、冷冻管、斜面试管中的处于休眠状态的菌种接入试管斜面或液体培养基活化,再经过扁瓶或摇瓶及种子罐、增殖罐等逐扩大规模培养而获得大量生产性能优良的纯种过程。
种子扩大培养增加菌体的数量,满足工业化生产对菌种大量的需求。菌体达到定浓度不仅是高效率和高质量生产的保证,而且是缩短发酵周期、降低生产成本的必然要求。因此,在工业化大规模生产中,生物反应器中的菌体必须达到定的浓度。工业化生产的规模非常大,达到生产工艺所要求的菌体浓度所需要的菌体数量巨大;另方面,直接保藏的菌体数量较少,远远小于工业化生产规模所需要的菌体数量,所以必须通过种子扩大培养,大幅度增加菌体数量。种子扩大培养可以提升种子生产性能。先,通过营养物质的充分供应和适宜环境的控制,可激发菌体的新陈代谢活力,让菌体生长代谢旺盛;其次,在扩大培养过程中通过调节培养基组成、发酵温度、ph等因素逐步向生产阶段的真实环境逼近,调理菌体的代谢,让菌体在快速增殖的同时使菌体的各项生理性能向适宜于生产需要的方向趋近。
菌种经过扩大培养后,以优势菌进行生产可以减少杂菌污染几率,减少“倒罐”现象,是成功生产的保证。扩大培养工艺的实施,可以有效缩短生产周期,提高生产效率。
2、种子的要求
优质种子必须具备五项基本的条件:①满足工业化大规模生产的菌体数量;②菌种的生长活力高,接种到发酵罐后能迅速生长繁殖;
③生理和生化性状稳定,生产的产品质量稳定;④无杂菌污染;⑤有稳定的生产能力,产品的生物合成持续稳定高产。
要达到以上要求,必须具备以下条件:①适宜的菌种复苏方法,使菌种在活化培养基上的菌种存活率达到大;②具有无菌操作所需要的环境和设备;③具有良好的种子质量检验方法。
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