马血清给特别滴细胞特别滴“爱”
大家都知道，胎牛血清是细胞培养界的“香饽饽”，备受胞胞们的“宠爱”，其实还有一个“香煎饼”，大家可知道？对一些“挑食”的细胞，马血清可谓是散发着一股“煎饼的清香”。
图1 马血清优级（abs989）
一、马血清的第一大功能是“滋养”一些特别的细胞，如免疫细胞类、成纤维细胞类、上皮细胞类、神经细胞类等。需要添加马血清的常见细胞类型如下：
1）nk（人外周血自然杀伤细胞）和nk-92（人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞）
营养体系：74% α-mem基础培养基（abs9506）＋ 0.2mm inositol（abs816057）＋ 0.1mm β-mercaptoethanol（abs9592）＋ 0.02mm folic acid（abs812845）＋ 100-200u/ml recombinant il-2（abs04045）+ 12.5 %马血清优级（abs989）+ 12.5% 胎牛血清优级（abs972）+ 1% 双抗（abs9244）
2）el-4（小鼠胸腺淋巴瘤细胞）
营养体系：89% dmem高糖基础培养基（abs9483）+ 10% 马血清优级（abs989）+ 1% 双抗（abs9244）
3）l929（小鼠成纤维细胞）和crfk（猫肾细胞）
营养体系：89% mem基础培养基（abs9503）+ 10% 马血清优级（abs989）+ 1% 双抗（abs9244）
4）mcf 10a（人正常乳腺上皮细胞）
营养体系：94% dmem/f12基础培养基（abs9561）+ 5% 马血清（abs989）+ 1% 双抗（abs9244）+20ng/ml egf（abs04176）+ 0.5ug/ml 氢化可的松hydrocortisone（abs814512）+ 100ng/ml 霍乱霉素choleratoxin+10ug/ml 胰岛素insulin（abs42225219）
5）pc-12（undifferentiated）（大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（未分化））
营养体系：79% rpmi1640基础培养基（abs9484）+ 15% 马血清（abs989）+ 5% 胎牛血清优级（abs972）+ 1% 双抗（abs9244）
二、马血清第二大功能是诱导分化作用，有文献报道【1】马血清在 5-氮杂胞苷诱导脂肪干细胞成肌细胞实验中发挥重要作用。
该研究如下：将第1代长满100 mm培养皿的脂肪干细胞传代至3个6孔板，实验组培养基中加入体积分数为 5% 马血清 +10 μmol/l 5-氮杂胞苷；对照组培养基中单纯添加 10 μmol/l 的 5-氮杂胞苷；空白组为单纯低糖 dmem 培养基，其余培养、传代及鉴定所需的条件相同。每日光镜观察记录形态，在培养的第 7、14、28、35 天行免疫荧光和流式细胞仪检测肌蛋白表达差异。
该文献的结果与结论是免疫荧光检测成肌特异性胞质蛋白表达以及流式细胞检测相应蛋白表达率提示，加入马血清后的实验组脂肪干细胞的成肌速度和诱导成肌所需时间明显比单纯加入 5-氮杂胞苷的对照组更有优势。实验初步表明马血清在促进脂肪干细胞诱导成肌方面起着缩短诱导成肌所需时间的作用。
同时，马血清在诱导 c2c12（小鼠成肌细胞）分化为多核肌管方面也发挥重大作用。c2c12 细胞是由 d·yaffe 和 o·saxel 建立的小鼠成肌细胞株的亚克隆；该细胞分化很快，形成可伸缩的肌管并生成特征性的肌蛋白。将状态良好的骨骼肌细胞以 0.9×105 接种在96孔板上（每孔100ul），置于培养箱中培养 24h 后，待细胞融合到 70-80% 后，更换成的含有 2% 马血清的培养基中，进行诱导分化。（如图2所示）
图3 c2c12（小鼠成肌细胞）向多核肌管方向分化
另外，也有文献报道【2】传代培养人骨髓间充质干细胞（p3）在 20% 马血清的 l-dmem 培养液中可分化为脂肪细胞。
此外，10% 马血清可代替 fbs 用于支持绵羊红细胞的体外抗体应答；血清 igg 制备，白蛋白的提取及生物活性研究；免疫组化（ihc）、酶联免疫（elisa）等免疫实验的封闭剂。
参考文献
【1】刘杰,傅强.马血清在脂肪干细胞成肌诱导中的作用[j].中国组织工程研究, 15(14)
【2】赵文静,陈亚洁,刘薇.人骨髓间充质干细胞分离培养及生物学特性研究.中国现代医学杂志.2006.16(18):2744-2747
本期讲解就到这里了，如有细胞培养问题，欢迎微信公众号后台留言~
注：图源网络和客户，仅供参考学习用
表 细胞培养类产品推荐
货号
品名
规格
abs981
胎牛血清（特级）
500ml
abs972
胎牛血清（优级）
500ml
abs974
胎牛血清(标准级）
500ml
abs9483
高糖dmem培养基
500ml
abs9484
rpmi-1640培养基
500ml
abs9505
mem培养基
500ml
abs9506
α-mem培养基
500ml
abs9554
ham's f-12培养基
500ml
abs9563
ham's f-12k培养基
500ml
abs9561
dmem/f-12培养基
500ml
abs962
pbs缓冲液
500ml
abs970
d-pbs缓冲液（不含 ca2+mg2+）
500ml
abs971
d-pbs缓冲液（含 ca2+mg2+)
500ml
abs9257
hanks平衡盐溶液（不含 ca2+mg2+)
500ml
abs9258
hanks平衡盐溶液（含 ca2+mg2+)
500ml
abs47014938
胰蛋白酶-edta消化液（0.25%） ，含酚红
100ml
abs47047375
胰蛋白酶-edta消化液（0.25%），不含酚红
100ml
abs9479
无dmso无血清细胞冻存液
100ml
abs9417
无血清细胞冻存液
100ml
abs9473
细胞冻存液（含血清）
100ml
abs9474
组织保存液
100ml
abs9480
组织冻存试剂盒
30ml
abs9486
模具
1个/套
abs9487
小刀
5片/包
abs9481
组织复苏试剂盒
50ml
abs42020125
卡那霉素b硫酸盐
250mg
abs42018967
硫酸庆大霉素溶液
10ml
abs9244
青链双抗
100ml
abs9245
青霉素-链霉素-庆大霉素混合溶液
100ml
abs42013298
两性霉素b
1g
abs44071148
制霉菌素
1g
abs9246
青霉素-链霉素-两性霉素b混合溶液
100ml
abs9252
支原体检测试剂盒
100t
abs9375
支原体清除试剂
200ul×5
abs9376
支原体预防
500ul×4
abs816578
环丙沙星盐酸盐
500mg
abs9374
水盘抑菌剂
20ml
abs9371
水浴锅抑菌剂
100ml
abs9372
培养箱除菌剂
480ml
abs9373
细胞房除菌剂
480ml
absin特色产品线：
wb相关：ecl发光液、预染marker、预制胶；ihc相关：二抗试剂盒、组化笔；ip/coip试剂盒；激动剂/抑制剂；血清、bsa、蛋白酶k、ctb、ttx、cee；凋亡试剂盒；呼吸爆发试剂盒；elisa试剂盒；重组蛋白；抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体；定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...
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1）nk（人外周血自然杀伤细胞）和nk-92（人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞）
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营养体系：89% dmem高糖基础培养基（abs9483）+ 10% 马血清优级（abs989）+ 1% 双抗（abs9244）
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营养体系：89% mem基础培养基（abs9503）+ 10% 马血清优级（abs989）+ 1% 双抗（abs9244）
4）mcf 10a（人正常乳腺上皮细胞）
营养体系：94% dmem/f12基础培养基（abs9561）+ 5% 马血清（abs989）+ 1% 双抗（abs9244）+20ng/ml egf（abs04176）+ 0.5ug/ml 氢化可的松hydrocortisone（abs814512）+ 100ng/ml 霍乱霉素choleratoxin+10ug/ml 胰岛素insulin（abs42225219）
5）pc-12（undifferentiated）（大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（未分化））
营养体系：79% rpmi1640基础培养基（abs9484）+ 15% 马血清（abs989）+ 5% 胎牛血清优级（abs972）+ 1% 双抗（abs9244）
二、马血清第二大功能是诱导分化作用，有文献报道【1】马血清在 5-氮杂胞苷诱导脂肪干细胞成肌细胞实验中发挥重要作用。
该研究如下：将第1代长满100 mm培养皿的脂肪干细胞传代至3个6孔板，实验组培养基中加入体积分数为 5% 马血清 +10 μmol/l 5-氮杂胞苷；对照组培养基中单纯添加 10 μmol/l 的 5-氮杂胞苷；空白组为单纯低糖 dmem 培养基，其余培养、传代及鉴定所需的条件相同。每日光镜观察记录形态，在培养的第 7、14、28、35 天行免疫荧光和流式细胞仪检测肌蛋白表达差异。
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同时，马血清在诱导 c2c12（小鼠成肌细胞）分化为多核肌管方面也发挥重大作用。c2c12 细胞是由 d·yaffe 和 o·saxel 建立的小鼠成肌细胞株的亚克隆；该细胞分化很快，形成可伸缩的肌管并生成特征性的肌蛋白。将状态良好的骨骼肌细胞以 0.9×105 接种在96孔板上（每孔100ul），置于培养箱中培养 24h 后，待细胞融合到 70-80% 后，更换成的含有 2% 马血清的培养基中，进行诱导分化。（如图2所示）
图3 c2c12（小鼠成肌细胞）向多核肌管方向分化
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abs962
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500ml
abs970
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500ml
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d-pbs缓冲液（含 ca2+mg2+)
500ml
abs9257
hanks平衡盐溶液（不含 ca2+mg2+)
500ml
abs9258
hanks平衡盐溶液（含 ca2+mg2+)
500ml
abs47014938
胰蛋白酶-edta消化液（0.25%） ，含酚红
100ml
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100ml
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无dmso无血清细胞冻存液
100ml
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无血清细胞冻存液
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100ml
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组织保存液
100ml
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组织冻存试剂盒
30ml
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模具
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小刀
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absin特色产品线：
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300吨/天生活污水处理设备一体机
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