分享细胞培育的相关技能
细胞的复苏概述
复苏细胞要求快速融化的手法，这样可以确保细胞外结晶在很短的时间内即融化。防止由于缓慢融化使水分进入细胞内构成胞内再结晶对细胞构成危害
细胞的用品
培养液、吸管、离心管、培养瓶
细胞的过程
1 翻开水浴锅，将温度调至 37 ℃；
2 从液氮中取出冻存的细胞株，用镊子夹住冻存管（戴防护面罩），灵敏置入 37 ℃的水浴锅中，不断振摇冻存管，使之赶快融化，要在 1-2 min 内完成复温
3 *融化后，取出冻存管，移至超净工作台，用 75%酒精擦拭消毒，用无菌吸管罗致细胞悬液移至无菌离心管，加 10 倍的含 10%胎牛血清的培养液，用吸管轻轻吹匀
4 细胞悬液离心，1000rpm，5-8min，小心弃上清液。参加适量含 10%胎牛血清的培养液，接种于培养瓶中，置于 37℃、5% co2、饱和湿度孵箱中培养
5 次日替换培养基，今后按常规培养方法进行培养。假设复苏时细胞密度较高及时传代。细胞复苏时细胞密度以 5×105 个/ml
细胞的传代
培养细胞传代根据不同的细胞采纳不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代；部分贴壁生长但粘附不牢固的细胞也可以用直接吹打传代；悬浮生长的细胞可以选用直接吹打或离心堆积后再别离传代，或直接用天然沉降法吸除上清后，再吹打传代
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