教你如何选择合适的液相色谱柱

液相色谱柱,是一种用于液体色谱分析仪器的部件。那么我们该如何的去选择液相色谱柱呢?下面我们就一起来看看吧。在选择色谱柱之前,先多了解自己的样品和杂质,他们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等,液相色谱柱决定终分离效果,所以在选择色谱柱时候有必要考虑清楚自己的需求。
首先液相色谱柱目前来说分为正反相色谱柱,正相有si等,反相有c18等。正相主要分离极性物质,反相主要分离非极性物质,氨基柱等主要分离二者之间的。
明确了色谱柱大概功能之后,确认下自己样品信息,基本就有点眉目了,方向对了,剩下的事情就是细节了如:键合相、粒径、孔径、碳载量等
1.样品是极性的且弱酸性的;就可以选择c18在99%酸性水溶液条件下检测,即要选择承受99%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱
2. 如果样品极性太强,或酸性太强;可以选择cn,nh2,或硅胶柱,hilic(亲水色谱),也有使用c18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱(缺点是离子对试剂平衡时间长,对流动相ph要求比较精密,否 则很难重复实验,另外离子对试剂很难洗下来,基本上用了离子对的色谱柱就不能再用于其它实验)
3. 若样品是碱性的;可选择高纯硅胶柱(高纯硅胶缺少金属杂质,且硅胶端基封尾)或一些经过修饰的c18柱(如极性嵌入技术或碱去活技术等),他们都会减少碱性化合物的拖尾,一般会选择中性或偏碱的条件下做,因为这样可增加碱性样品的保留
4.如果碱性化合物的极性太强,或碱性太强;可以选择宽ph的c18色谱柱在高ph值检测(优点是方法开发简单,缺点是目前实 现这一技术的色谱柱品牌比较少,价格也高)或者选用hilic色谱柱(硅胶柱在反相条件下使用,这也是很经典的检测碱性样品的方法)选择强离子交换柱(缺点 是不能用来分析其它样品,对流动相ph要求比较精密,否则很难重复实验)也有使用c18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱
关键词:色谱柱 色谱分析仪

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