如何使用PVDF膜？
了解或者做过western blot的同学都应该清楚，经过电泳分离后的蛋白质样品需经过“转膜”步骤，将蛋白从page胶转移到膜上进行固定后，才能进行后续各种方法的western blot的检测。western blot中膜的选择是实验成功的关键点，实验中一般可以选择硝酸纤维素膜(nc) 和pvdf膜，pvdf膜结合能力强且具有较强的机械强度，可以重复使用。那么你知道该如何使用pvdf膜吗？让我们一起来看看吧！
一、何为pvdf膜？如何选择pvdf膜?
pvdf膜即聚偏二氟乙烯膜（polyvinylidene fluoride）是蛋白质印迹法中常用的一种固相支持物。pvdf膜是疏水性的，膜孔径有大有小，随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。大于20kda的蛋白选用0.45μm的膜，小于20kda的蛋白选用0.2μm的膜。
二、pvdf膜使用时要用甲醇浸泡吗？
pvdf膜在使用时需要进行预处理，用甲醇处理的目的就是活化膜上的正电基团，使其更容易与带负电的蛋白结合。pvdf膜本质是一种疏水性的聚合物，在水溶液中不会浸湿。为了在水性缓冲液和系统中使用pvdf膜，首先必须将其浸泡在50%(v/v)或更高浓度的醇溶液中。甲醇、乙醇和异丙醇都适合浸泡这种膜。
三、如何确定pvdf膜转膜成功
可以采用染色法来确定转膜是否成功，pvdf膜染料分2类，可逆染料和不可逆染料。
可逆染料在评估印迹之后可被从膜上洗掉。这些操作不干扰后续的免疫检测或印迹上蛋白的其它分析。zui常用的可逆蛋白染料是丽春红。可逆染料的主要缺点在于它们的灵敏度低于不可逆染料，但是在大部分情况下并不影响使用。
不可逆染料通常表现出最佳的灵敏度，但会干扰或阻止蛋白的进一步分析。不可逆染料有氨基黑和考马斯亮蓝等。
四、pvdf膜的保存
在wb曝光结束后仍需要保存膜以便后续使用，膜的保存条件是由与膜结合的蛋白的稳定性决定的。尽管pvdf是一种化学耐受性好的聚合物，有着出色的长期稳定性。但是我们还是建议低温保存，当然室温对于一些蛋白也是可以的。pvdf膜在4℃下最多保存2周，-20℃下最多2个月，-70℃下可以长期保存。
注意：保存在冰箱冷冻室的印迹膜不能受到机械冲击，这会导致膜破损。印迹膜应恢复到室温后才从塑料袋中取出。印迹膜也可放在塑料袋中置于4℃，但应加入叠氮化na等杀菌剂，以防止细菌生长。在使用之前必须彻di洗掉叠氮化物，以免抑制hrp的活性。
更多有关pvdf膜的使用问题，请联系天津益元利康生物科技有限公司。
玻璃钢脱硫塔的防火措施必须要知道
电子试验机的七个鉴定标准
H5B-2FW便携COD快速检测仪5-10000mg/L
食品安全国家标准 酒和食用酒精中乙醇浓度的测定 - U形振荡管数字密度计
奥林巴斯荧光显微镜技术参数|奥林巴斯荧光显微镜价格|奥林巴斯荧光显微镜配置|奥林巴斯荧光显微镜标准是什么|奥林巴斯荧光显微镜的现货在哪里|奥林巴斯荧光显微镜含几组激发模块|
如何使用PVDF膜？
蛋白定量试剂盒是生命科学领域的重要工具
把好货物进出*关 港口安全智能化管控抓紧推进
电动盲板阀F943X-2.5C电动推杆盲板阀F9T43X-2.5C电动推杆式扇形眼镜阀特点
食品微生物检测中菌落总数测定
影响制药厂污水流量计计量精度的因素有哪些
无心磨床的工作原理及优点
如何判断一台数控加工中心机床的精度？
AS-01启动信号板的组成和应用
制冰机怎么清洗？
果蔬清洗机的功能原理操作
双核臭氧发生器呵护中兴食品安全，“*消毒”显
全封闭拖链的应用与发展
高低温箱的温度传感器显现精度问题
大肠杆菌的生化特性简介以及在生物技术中的应用
一、何为pvdf膜？如何选择pvdf膜?
pvdf膜即聚偏二氟乙烯膜（polyvinylidene fluoride）是蛋白质印迹法中常用的一种固相支持物。pvdf膜是疏水性的，膜孔径有大有小，随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。大于20kda的蛋白选用0.45μm的膜，小于20kda的蛋白选用0.2μm的膜。
二、pvdf膜使用时要用甲醇浸泡吗？
pvdf膜在使用时需要进行预处理，用甲醇处理的目的就是活化膜上的正电基团，使其更容易与带负电的蛋白结合。pvdf膜本质是一种疏水性的聚合物，在水溶液中不会浸湿。为了在水性缓冲液和系统中使用pvdf膜，首先必须将其浸泡在50%(v/v)或更高浓度的醇溶液中。甲醇、乙醇和异丙醇都适合浸泡这种膜。
三、如何确定pvdf膜转膜成功
可以采用染色法来确定转膜是否成功，pvdf膜染料分2类，可逆染料和不可逆染料。
可逆染料在评估印迹之后可被从膜上洗掉。这些操作不干扰后续的免疫检测或印迹上蛋白的其它分析。zui常用的可逆蛋白染料是丽春红。可逆染料的主要缺点在于它们的灵敏度低于不可逆染料，但是在大部分情况下并不影响使用。
不可逆染料通常表现出最佳的灵敏度，但会干扰或阻止蛋白的进一步分析。不可逆染料有氨基黑和考马斯亮蓝等。
四、pvdf膜的保存
在wb曝光结束后仍需要保存膜以便后续使用，膜的保存条件是由与膜结合的蛋白的稳定性决定的。尽管pvdf是一种化学耐受性好的聚合物，有着出色的长期稳定性。但是我们还是建议低温保存，当然室温对于一些蛋白也是可以的。pvdf膜在4℃下最多保存2周，-20℃下最多2个月，-70℃下可以长期保存。
注意：保存在冰箱冷冻室的印迹膜不能受到机械冲击，这会导致膜破损。印迹膜应恢复到室温后才从塑料袋中取出。印迹膜也可放在塑料袋中置于4℃，但应加入叠氮化na等杀菌剂，以防止细菌生长。在使用之前必须彻di洗掉叠氮化物，以免抑制hrp的活性。
更多有关pvdf膜的使用问题，请联系天津益元利康生物科技有限公司。
玻璃钢脱硫塔的防火措施必须要知道
电子试验机的七个鉴定标准
H5B-2FW便携COD快速检测仪5-10000mg/L
食品安全国家标准 酒和食用酒精中乙醇浓度的测定 - U形振荡管数字密度计
奥林巴斯荧光显微镜技术参数|奥林巴斯荧光显微镜价格|奥林巴斯荧光显微镜配置|奥林巴斯荧光显微镜标准是什么|奥林巴斯荧光显微镜的现货在哪里|奥林巴斯荧光显微镜含几组激发模块|
如何使用PVDF膜？
蛋白定量试剂盒是生命科学领域的重要工具
把好货物进出*关 港口安全智能化管控抓紧推进
电动盲板阀F943X-2.5C电动推杆盲板阀F9T43X-2.5C电动推杆式扇形眼镜阀特点
食品微生物检测中菌落总数测定
影响制药厂污水流量计计量精度的因素有哪些
无心磨床的工作原理及优点
如何判断一台数控加工中心机床的精度？
AS-01启动信号板的组成和应用
制冰机怎么清洗？
果蔬清洗机的功能原理操作
双核臭氧发生器呵护中兴食品安全，“*消毒”显
全封闭拖链的应用与发展
高低温箱的温度传感器显现精度问题
大肠杆菌的生化特性简介以及在生物技术中的应用