钙浓度检测试剂盒说明书
分光光度法50管/48样
测定意义:
血钙几乎全部存在于血浆中,所以血钙主要指血浆钙。血浆钙有离子钙和结合钙两种形式,其中只有离子钙直接起生理作用,它与结合钙处于动态平衡,并受血液ph的影响。血钙水平与多种重要的生理功能相关,过高或过低都会影响正常生理功能。本试剂盒用于检测血液中游离钙浓度。
测定原理:
在强碱溶液中游离钙与gbha反应生成红色钙-gbha复合物,在520 nm有吸收峰;通过测定520 nm吸光度,计算游离钙浓度。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、无水甲醇、丙酮和蒸馏水。
试剂组成和配置:
试剂一:液体×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体×1瓶(空瓶,试剂自备)。取30 ml试剂瓶。依次加入27 ml无水甲醇和3 ml丙酮,盖紧混匀即可。
标准液:液体×1瓶,3μmol/ml,4℃保存。
血钙浓度测定操作:
1. 分光光度计预热30 min以上,调节波长到520 nm,蒸馏水调零。
2. 空白管:取1ml玻璃比色皿,依次加入蒸馏水50μl,试剂一200 μl,混匀;再加入试剂二200μl,混匀;zui后加入试剂三400μl,混匀;静置5min后于520 nm测定吸光度a空白管。做一个空白管即可。
3. 标准管:取1ml玻璃比色皿,依次加入标准液50μl,试剂一200 μl,混匀;再加入试剂二200μl,混匀;zui后加入试剂三400μl,混匀;静置5min后于520 nm测定吸光度a标准管。做一个标准管即可。
4. 测定管:取1ml玻璃比色皿,依次加入血液样品50μl,试剂一200 μl,混匀;再加入试剂二200μl,混匀;zui后加入试剂三400μl,混匀;静置5min后于520 nm测定吸光度a测定管。记为a测定管。
注意:加试剂三后,应该在30 min内完成该管的测定。
血钙浓度计算:
血钙含量(μmol /dl血液)= [c标准液×(a测定管-a空白管)÷(a标准管-a空白管)]×v样品总=300×(a测定管-a空白管)÷(a标准管-a空白管)
c标准液:3μmol/ml;v样总:样品总体积,1 dl=100 ml。
注意事项:宜早晨空腹采血,并且采血后应该尽快完成测定。
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