Strep-tag II磁珠 技术问答
strep-tag ii磁珠
海狸strep-tag ii磁珠可以在生理条件下纯化得到使strep-tag融合蛋白。与其他tag相比，这些温和的纯化参数能保存蛋白质的生物活性，并仅经一步层析后即可产出超过99%的纯度。
1.strep-tagii磁珠纯化的技术原理是什么呢？
答：主要基于strep –tagii多肽与strep-tactin（一种经过特殊工艺改造的链酶亲和素）的相互作用，在生理缓冲液或是含有其他添加剂的环境下，带有标签的蛋白与固定化的strep tactin亲和纯化，经过加有2.5mm脱硫*的同种缓冲溶液中即可温和地将纯化的重组蛋白洗脱下来。 这些温和的纯化参数能保存蛋白质的生物活性，并可获得纯度超过99%的目标蛋白。
2.strep-tagii的分子量大约是多少？通常在融合蛋白的什么位置？
答：strep-tagii多肽有8个氨基酸( trp-ser-his-pro-gln-phe-glu-lys）分子量约为1kda.作为标签可以在蛋白的n端或是c端，也可以作为两个蛋白域的链接，甚至可以用于换种结构中。
3.strep-tag磁珠的载量如何呢？
答：海狸纳米磁珠蛋白结合量可以达到7mg strep-tag ii蛋白 /ml gel
4.纯化蛋白的纯度如何？
答：纯度＞95%。但是如果存在重组蛋白非特异性互作就可能降低蛋白纯度。为了减少污染，可以再结合洗涤和洗脱时加入合适的添加剂(如还原剂，盐，温和的去污剂)。如果是二硫键共价结合的杂蛋白，可以在缓冲液中加入还原剂。非共价键结合一般采用提高离子强度的方法，常用nacl或triton x-100，tween20和chaps等。
5.strep-tagii磁珠结合抗生素的蛋白吗？
答: 不会。
6.洗脱下来的蛋白质混有脱硫*吗？
答:没有，脱硫*不会与蛋白结合货干扰蛋白分析，而且容易通过透析或是过滤去除。
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2.strep-tagii的分子量大约是多少？通常在融合蛋白的什么位置？
答：strep-tagii多肽有8个氨基酸( trp-ser-his-pro-gln-phe-glu-lys）分子量约为1kda.作为标签可以在蛋白的n端或是c端，也可以作为两个蛋白域的链接，甚至可以用于换种结构中。
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