大鼠(acetyl-p65)试剂盒样本处理及要求:
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用edta或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的pbs (0.01m, ph=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将*碎。将剪碎的组织与对应体积的pbs(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9ml的pbs,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。*在pbs中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
[需要而未提供的试剂和器材]
1.酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10ul、2-20ul、20-200ul、200-1000ul
3.37℃恒温箱
4.蒸馏水或去离子水
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