B 淋巴细胞膜表面免疫球蛋白（SmIg）的检查实验
实验方法原理 smig 是b 细胞的抗原识别受体，也是b 细胞特异的表面标志，用直接免疫荧光法可检查出smig。用荧光素标记的抗ig 抗体，在一定条件下与淋巴细胞混合，荧光素标记的抗ig 抗体可以与b 细胞表面的ig 结合，在荧光显微镜下观察可见b 细胞膜上出现荧光。此方法可用来鉴定b 淋巴细胞。
实验材料 icr 小鼠
试剂、试剂盒 异硫氰酸荧光素（fitc）标记的兔抗小鼠ig 抗体hank's液
仪器、耗材 台式离心机离心管吸管移液管
实验步骤
1. 采用颈椎脱臼法处死小鼠，解剖取出脾脏放入盛有6 ml hank's液的平皿中，用100 目钢网研磨，混匀。从中吸取1 ml细胞悬液放入一试管中，加满hank's液，离心1000 rpm，10 分钟，洗涤细胞一遍。倾去上清，沉积的细胞恢复1 ml容积，即为约1×107 /ml的细胞悬液。另取一支试管，吸取1×107 /ml的细胞悬液0.4 ml加hank's液3.6 ml，即为1×106 /ml的细胞悬液。
2. 取2 ml离心管两只，各加入1×106 /ml的细胞悬液1 ml，用台式离心机离心2000 rpm，3 分钟，弃去上清液。一支加入荧光素标记的兔抗鼠ig抗体100 μl，另一支不加抗体作对照，置4 ℃冰箱30 分钟。
3. 取出离心管，用hank's 液洗涤细胞两次，以去除游离的抗体，zui后一次离心后弃去上清液，留少许回流液，混匀，滴片，用荧光显微镜观察。
收起
注意事项
一、在滴片前要*去除游离的抗体，以避免假阳性结果。
收起
其他
一、实验结果
荧光显微镜观察，落射激发光下smig 阳性细胞可见环状或斑点状荧光。用钨丝灯光源透射光照明计数同一视野内淋巴细胞总数，共计数200～300 个淋巴细胞，算出其中smig 阳性细胞的百分数。
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