brilliant blue g
brilliant blue g
产品描述
考马斯亮蓝(coomassie brilliant blue)是两种相似三苯甲烷染料的总称,有g250和r250两种,结构上前者比后者多了2个甲基,命名上“g”为green的缩写,因g250的蓝色染料泛浅绿色;命名上“r”为red的缩写,因r250的蓝色染料呈微红色调;“250”表示考马斯亮蓝的纯度。生化实验中常将考马斯亮蓝用于蛋白定量和蛋白电泳中蛋白染色。工作原理是:通过与蛋白质内的氨基和羧基基团间的静电结合作用以及范德华力,考马斯亮蓝与蛋白质形成强但非共价键连接的复合物。蛋白-染料复合物的形成稳定染料携带的负电荷阴离子(如磺酸基),从而产生在膜上或者胶上肉眼可见的蓝色。
考马斯亮蓝r250(coomassie brilliantblue r250)更多用于电泳蛋白的染色,染色灵敏度比氨基黑高5倍,可达0.1μg蛋白。但是染色背景比较深,需要褪色后才能进行蛋白条带的观察。考马斯亮蓝g250对蛋白胶染色的灵敏度相对较差,zui低检测到0.5μg蛋白。但是因其在三氯酸中不溶而以胶体形式存在,选择性的和蛋白质结合形成复合物,染色迅速,着色深的蛋白质条带数秒内可以显现出来,约45min后着色zui深。而且染色背景低,不需要脱色即可进行蛋白条带的观察。因此,非常适合对电泳凝胶蛋白的快速定性分析。
考马斯亮蓝g250较多的用于溶液体系中蛋白的定量分析,即bradford蛋白结合检测法(bradfordprotein-binding assay),此方法利用的就是g250与蛋白质结合的特性,bradford试剂(也就是酸化的g250溶液)为阳离子,主要为双质子化,溶液为红色,其zui大吸收波长(amax)为470nm。当与蛋白稳定结合后,g250以阳离子,非质子化的形式存在,溶液变为蓝色,zui大吸收波长迁移到595 nm。蓝色阳离子形式染料的量与样本中蛋白的量成正比,因此通过直接测定595nm的吸光度来反映蛋白量。此法的优点在于g250与蛋白质结合所需的时间较短(约2min左右),且结合的g250-蛋白质复合物室温下约1h内保持稳定。反应灵敏度高,是一种非常常用的微量蛋白快速定量方法。
产品性质
中文别名(chinese synonym)
酸性蓝90;考马斯亮蓝g;康美赛蓝g250
英文别名(english synonym)
acid blue 90 coomassie brilliant blue g
cas号(cas no.)
6104-58-1
分子式(formula)
c47h48n3nao7s2
分子量(molecular weight)
854.02
外观(appearance)
蓝色至红色结晶粉末
溶解性(solubility)
微溶于水,先溶于甲醇或者乙醇。
结构式(structure)
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