细胞培养中常见的『液体试剂』

细胞的体外培养技术,是细胞生物学的一项基本实验。了解细胞培养的目的、实验材料、实验步骤等知识,有利于培养出更健康的细胞,更好地应用于科学实验中。
本期内容,我们来探讨细胞培养过程中,常见的液体试剂。
培养基是细胞赖以生存的液体环境的提供者,人工模拟细胞在体内生长的营养环境,为细胞营养、促进细胞生长增殖的物质基础。
基础培养基是水、无机盐、碳水化合物、维生素、氨基酸等成分的混合溶液。一般情况下,会通过补加血清或是各类不同等成分,配制为适合不同细胞生长繁殖的培养基。实验中,可以通过atcc查询所培养的细胞适合什么类型的培养基,配制比例是多少。
培养基可以是粉剂或液体,英文均为medium。
培养基有助于保持培养体系中的ph值和渗透压平衡,是控适宜细胞生长的重要且复杂的因素。
对于一些培养难度较大的细胞,选择一款能够与细胞“契合”的培养基,有利于维持细胞实验结果的稳定。另外,培养基使用的便捷程度,也是不可忽视的一个方面。
ausbian干细胞培养基,是在含微量胎牛血清的基础培养基中,通过添加一种人永生化干细胞系的条件培养基混合组成,是一款即用型培养基。解冻后即可参与干细胞培养,无需二次配制,方便快捷且高效。
根据供体动物或采血时间的差异,血清分为许多种类。用于动物细胞培养的血清主要有牛血清、马血清、猪血清等。其中,牛血清的使用更为广泛,胎牛血清凭借其丰富的营养,支持多种细胞生长繁殖的特性,深受科研人员喜爱。
合格的胎牛血清,应采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血,内毒素含量也应严格控制,过高的内毒素会导致细胞提前衰老、凋亡,细胞状态变差,相应的实验结果也容易产生波动。
ausbian进口特级胎牛血清,采自5-8月龄牛胚胎,澳洲血源,出厂前均经过严格质控,并附详细《检测报告》,内毒素含量≤3eu/ml,尽可能降低内毒素对细胞的影响,为细胞创造一个健康的生长环境,有利于实验的稳定。
在无菌的理想状态下,是没有必要添加抗生素的。但由于实验环境在实际中没要办法做到真正的无菌,所以很多科研人员会“习惯性、预防性”地添加抗生素。
但事实上,抗生素并不是「免死金牌」,真菌、支原体这些污染是它不能够对抗的,甚至滥用还会适得其反。
一些文献中表明:β-内酰胺类抗生素及氨基糖甙类抗生素,对真核细胞培养有抑制增殖作用,在原代细胞和干细胞等难养细胞上尤其明显。有研究人员发现,抗生素(双抗:青霉素和链霉素)的使用影响人体肝细胞中基因表达与基因调控。
虽然抗生素对真核细胞生长的影响机制至今尚未明确,但是为了细胞更好的生长,实验结果更加准确和稳定,在实验过程中尽量不要随意使用。实验室的环境卫生需要精心维护。
定期清洁、规范操作都是尽量避免实验污染的好方法。德国mb公司的支原体污染祛除试剂
细胞培养中,还可能会用到一些其他液体试剂。
比如用于细胞消化的胰酶,也叫细胞消化液体。常用的胰酶溶液是0.25%、0.125%的胰蛋白酶与0.02%的二乙胺四乙酸二钠(edta) 调配的溶液。该消化液可以使细胞脱离粘附表面,形成单个细胞。
酚红指示剂,一种用于指示ph溶液,中性为红色,酸性为黄色,碱性为紫色。但并不是所有培养基都要添加酚红,应根据细胞种类、实验目的再决定
hepes,细胞培养中很常见的一种buffer;谷氨酰胺,可以作为细胞的能量来源,参与蛋白质的合成和能量代谢。但谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应在-20 ℃冰冻保存,添加到液体培养基后,在4℃保存,不要超过1周。

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