婴儿配方食品中的*测定细解（结果分析篇）
继上回的准备篇和菌种篇，这回要真正测定了。在各个测定管孵育20小时以上获得zui大浊度时，即可用涡旋振荡器混匀，之后倒入1cm比色杯，在540nm处测定吸光度（od值）。以未接种的对照管的od值为0，依次测定标准管、样本。如果对照管od值＞0.1，或者标准管od值变化＜40%，说明有杂菌或*混入，需重做。
测完od值后，以*含量为横坐标，每个标准管od均值为纵坐标，做标准曲线。根据样本od值和标准曲线，可以确定样品对应的*含量。关于标准曲线，有人发现od值随着*浓度增加而增长趋缓, 略呈s形。若使用线性方法，数据点分布在曲线两侧，求得的*浓度不准。建议使用excel功能建立4阶曲线方程，则曲线与实验数据的拟合程度较好（1）。
图1. 1阶线性拟合
图2. 4阶线性拟合，优于1阶
采用直接提取法进行的*含量可按如下公式进行计算。其前提是：每个样品有2个管*含量在0.10ng-0.80ng范围内，且各管间偏差小于10%。
计算公式：
*含量（g/100g）= (c*v*f)/m * 0.1
c为样品稀释液*浓度(ng/ml)，v为提取液定容体积（ml），f为样本提取液稀释倍数，m为样本质量（g），0.1为ng/g换算为g/100g的系数。
以上就是相对完整的测定过程，不仅适合婴儿配方食品，也适合谷薯、果蔬、豆及坚果类食品，只不过样品需要用酶解提取法。大致过程如下：准确称量适量试样（0.2-2g*），如坚果类是0.2-2g，至0.0001g，转入100ml锥形瓶中，加30mlpbs（含抗坏血酸作为*保护剂），混匀5分钟后高压灭菌。再加1ml鸡胰腺溶液。对于蛋白和淀粉含量丰富的样本，应再加1ml蛋白酶和*溶液。再加3至5滴甲苯后，37℃孵育16小时，再转入100ml容量瓶，加水定容，过滤。
之所以采取酶解法，是因为在一些食品中*以蛋白结合的形式存在，以上提取方法是依据中国预防*食品与卫生研究所对食品前提取方法进行的研究(2)。该研究还发现，蔬菜样品采用二次水解法效果比较好；*在酸性和过碱性环境中破坏严重，因此样品提取液和培养基ph值应控制在6.8-7.2。
世界微生物培养基生产商himedia提供全系列进口维生素测定用培养基，其中*干酪培养基（货号m543），*12测定培养基（货号m036），质量为标准，成分*符合我国相关食品安全标准。常规到货期4-6周，加急订单2-3周。详情可详询国内总代理北京缔一生物：。
参考文献
1.唐靓，等.国标〈食品中*的测定〉的标准曲线绘制与计算.中国卫生检验杂志. 2009,19(7):
2.王竹.样品前处理对食物中*测定的影响.卫生研究. 2000, 29 (6):404-406
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测完od值后，以*含量为横坐标，每个标准管od均值为纵坐标，做标准曲线。根据样本od值和标准曲线，可以确定样品对应的*含量。关于标准曲线，有人发现od值随着*浓度增加而增长趋缓, 略呈s形。若使用线性方法，数据点分布在曲线两侧，求得的*浓度不准。建议使用excel功能建立4阶曲线方程，则曲线与实验数据的拟合程度较好（1）。
图1. 1阶线性拟合
图2. 4阶线性拟合，优于1阶
采用直接提取法进行的*含量可按如下公式进行计算。其前提是：每个样品有2个管*含量在0.10ng-0.80ng范围内，且各管间偏差小于10%。
计算公式：
*含量（g/100g）= (c*v*f)/m * 0.1
c为样品稀释液*浓度(ng/ml)，v为提取液定容体积（ml），f为样本提取液稀释倍数，m为样本质量（g），0.1为ng/g换算为g/100g的系数。
以上就是相对完整的测定过程，不仅适合婴儿配方食品，也适合谷薯、果蔬、豆及坚果类食品，只不过样品需要用酶解提取法。大致过程如下：准确称量适量试样（0.2-2g*），如坚果类是0.2-2g，至0.0001g，转入100ml锥形瓶中，加30mlpbs（含抗坏血酸作为*保护剂），混匀5分钟后高压灭菌。再加1ml鸡胰腺溶液。对于蛋白和淀粉含量丰富的样本，应再加1ml蛋白酶和*溶液。再加3至5滴甲苯后，37℃孵育16小时，再转入100ml容量瓶，加水定容，过滤。
之所以采取酶解法，是因为在一些食品中*以蛋白结合的形式存在，以上提取方法是依据中国预防*食品与卫生研究所对食品前提取方法进行的研究(2)。该研究还发现，蔬菜样品采用二次水解法效果比较好；*在酸性和过碱性环境中破坏严重，因此样品提取液和培养基ph值应控制在6.8-7.2。
世界微生物培养基生产商himedia提供全系列进口维生素测定用培养基，其中*干酪培养基（货号m543），*12测定培养基（货号m036），质量为标准，成分*符合我国相关食品安全标准。常规到货期4-6周，加急订单2-3周。详情可详询国内总代理北京缔一生物：。
参考文献
1.唐靓，等.国标〈食品中*的测定〉的标准曲线绘制与计算.中国卫生检验杂志. 2009,19(7):
2.王竹.样品前处理对食物中*测定的影响.卫生研究. 2000, 29 (6):404-406
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