超微量紫外/荧光全功能分光光度计在RNA质控的应用

rna质控,我来帮你!
小编心里话:rna质控是个技术活儿!
对于每天泡在实验室的人来说,qpcr已是家常便饭。毫无疑问浓度高,纯度好,片段完整,才是我们理想中的rna样品。然而,rna总是娇气的存在!室温或4度极易降解,提取的时候容易有污染物残留。因此完整的rna质控包含了三个方面:浓度质控,纯度质控,片段完整性质控。
如何把控rna质量,继续反转录呢?
有一款rna质控的高手,既可以提供rna浓度质控,也可以提供rna纯度质控,没错,就是美国denovix公司提供的ds-11fx超微量紫外/荧光全功能分光光度计,看上去酷酷的rna纯度质控的标准方法是超微量分光光度计(光吸收)法,通过监控a260/230和a260/280的比值来判定rna的纯度。通常a260/280的比值范围在1.8-2.0之间,如果大于2.0则说明rna已经降解,如果低于1.8则说明含有蛋白质或其他杂质;而a260/230的比值如果小于2,则表明rna中含有酚类,盐等杂质。ds-11fx的微量光度计功能可以帮助科研人员来准确的判定rna样品的纯度。
下图为rna紫外法检测示意图,a260/280和a260/230都不在正常的比值范围,说明rna样品纯度很差,仪器会自动进行提示,两个黄色小三角就是警示图标哦,点击萌萌的黄色三角警示,仪器会显示污染物的种类,够智能吧,这就是ds-11的smartqc功能
图1 总rna的测量界面图(美国denovix,ds-11fx)
rna浓度质控的标准方法是荧光法,除非是纯度很高的rna也可以采用紫外法。荧光法采用rna特异性染料,可以准确的测量rna浓度。ds-11fx不但提供rna浓度质控,也可以提供dna和蛋白的浓度精确控制,功能超级强大哦。
dsdna,rna,ssdna,protein单独的荧光检测app
发表在cell stem cell的文章pax3 confers functional heterogeneity in skeletal muscle stem cell responses to environmental stress,作者提取卫星细胞的总rna,采用ds-11fx超微量/荧光全功能分光光度计进行rt-pcr之前的rna的质量把控和浓度鉴定。

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