2017弧菌检测的进展
近年来，创伤弧菌造成的感染事件时常发生。创伤弧菌已被列为海产品相关的一种重要病原菌，并已跻入弧菌三大病原菌之一。我国关于弧菌的检测标准主要有《gb 4789.7—2013 食品安全标准 食品微生物学检验 副溶血性弧菌检验》、《食品安全标准 食品微生物学检验 创伤弧菌检验（征求意见稿）》（2017年10月发布）等。
2017年，iso更新了弧菌的检测标准，即iso 21872-1-2017 食品和动物饲料微生物学 潜在肠道致病性弧菌属检测的水平方法 第1部分:副溶血性弧菌、霍乱弧菌和创伤弧菌的检测。该标准取代了2007年旧的版本，主要变化是引入了可选择的弧菌的分子鉴定方法（包括副溶血性弧菌、创伤弧菌、霍乱弧菌），并在附录e上增添了方法评价。但实际上，检测方法上，iso和我国标准还有一些不一样的地方。
iso指出，对增菌孵育温度的调整，可改善食品中弧菌的回收率。例如，在新鲜产品中，增菌时孵育41.5℃可使副溶血性弧菌和霍乱弧菌的回收率提高。在冷冻食品（-18℃以下）或腌制食品中，创伤弧菌、副溶血性弧菌和霍乱弧菌的增菌温度在37℃可使回收率提高。因此，在增菌环节，iso*的增菌液碱盐蛋白胨水（aspw）的孵育温度为41.5℃或37℃，6h。如果在冷冻或腌制品中三种菌都测，则是在37℃孵育。如果只测创伤弧菌（不论食品类型），也是37℃孵育。如果在新鲜食品中只检测副溶血性弧菌或霍乱弧菌，则增菌温度为41.5℃。
iso还*了二次增菌，也是用aspw，原则同上。分离菌则*同时采用tcbs和另一种选择性固体培养基。对于阳性菌落，验证可采用生化试验或pcr、qpcr。生化试验包括赖氨酸脱羧、*二氢化酶试验，-半乳糖苷酶试验、吲哚试验等。
世界微生物产品供应商himedia公司开发的hicrome弧菌显色培养基（货号mv1682），可同时分离鉴别副溶血性弧菌和霍乱弧菌。该显色培养基为高（碱性）ph，有助于选择性分离弧菌属。它根据细菌β-半乳糖苷酶和培养基中所包含底物反应的原理，霍乱弧菌菌落呈紫色，副溶血性弧菌菌落呈蓝绿色（见下图）。
该弧菌分离培养基用植物蛋白胨取代动物蛋白胨，更加环保，也避免了疯牛病风险，同时*同类进口产品。对于阳性菌落，还可进一步用himedia公司生产的弧菌生化鉴定条（货号kb007）来鉴定。该鉴定条包含了12种传统的生化试验，包括伏普试验、*脱羧试验、盐耐量试验（1%）、onpg试验
、柠檬酸盐利用试验、*脱羧试验、*发酵试验等，操作方便，结果准确，可鉴定28种弧菌，具体如下：
河口弧菌（v. aestuarianus）
溶藻弧菌（v. alginolyticus）
坎氏弧菌（v. campbellii）
鲨鱼弧菌（v. carchariae）
霍乱弧菌（v. cholerae）
辛辛那提弧菌（v. cincinnatiensis）
双氮养弧菌（v. diazotrophicus）
费氏弧菌（v. fischeri）
河流弧菌（v. fluvialis）
弗尼斯弧菌（v. furnissii）
产气弧菌（v. gazogenes）
哈维氏弧菌（v. harveyi）
霍氏弧菌（v. hollisae）
火神弧菌（v. logei）
地中海弧菌（v. mediterranei）
麦氏弧菌（v. metschnikovii）
拟态弧菌（v. mimicus）
飘浮弧菌（v. natriegens）
沙蚕弧菌（v. nereis）
黑美人弧菌（v. nigripulchritudo）
病海鱼弧菌（v. ordalii）
东方弧菌（v. orientalis）
副溶血性弧菌（v. parahaemolyticus）
解蛋白弧菌（v. proteolyticus）
杀鲑弧菌（v. salmonicida）
灿烂弧菌（v. splendidus）
塔氏弧菌（v. tubiashii）
创伤弧菌（v. vulnificus）
缔一生物作为himedia公司在中国的代理商，在微生物培养和检测领域，一如既往地为您带来的服务。
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iso指出，对增菌孵育温度的调整，可改善食品中弧菌的回收率。例如，在新鲜产品中，增菌时孵育41.5℃可使副溶血性弧菌和霍乱弧菌的回收率提高。在冷冻食品（-18℃以下）或腌制食品中，创伤弧菌、副溶血性弧菌和霍乱弧菌的增菌温度在37℃可使回收率提高。因此，在增菌环节，iso*的增菌液碱盐蛋白胨水（aspw）的孵育温度为41.5℃或37℃，6h。如果在冷冻或腌制品中三种菌都测，则是在37℃孵育。如果只测创伤弧菌（不论食品类型），也是37℃孵育。如果在新鲜食品中只检测副溶血性弧菌或霍乱弧菌，则增菌温度为41.5℃。
iso还*了二次增菌，也是用aspw，原则同上。分离菌则*同时采用tcbs和另一种选择性固体培养基。对于阳性菌落，验证可采用生化试验或pcr、qpcr。生化试验包括赖氨酸脱羧、*二氢化酶试验，-半乳糖苷酶试验、吲哚试验等。
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该弧菌分离培养基用植物蛋白胨取代动物蛋白胨，更加环保，也避免了疯牛病风险，同时*同类进口产品。对于阳性菌落，还可进一步用himedia公司生产的弧菌生化鉴定条（货号kb007）来鉴定。该鉴定条包含了12种传统的生化试验，包括伏普试验、*脱羧试验、盐耐量试验（1%）、onpg试验
、柠檬酸盐利用试验、*脱羧试验、*发酵试验等，操作方便，结果准确，可鉴定28种弧菌，具体如下：
河口弧菌（v. aestuarianus）
溶藻弧菌（v. alginolyticus）
坎氏弧菌（v. campbellii）
鲨鱼弧菌（v. carchariae）
霍乱弧菌（v. cholerae）
辛辛那提弧菌（v. cincinnatiensis）
双氮养弧菌（v. diazotrophicus）
费氏弧菌（v. fischeri）
河流弧菌（v. fluvialis）
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