天然有机物总氮含量的测定方法

天然有机物(如蛋白质和氨基酸等化合物)的总氮量通常用微量凯氏定氮法(micro-kjeldahl method)来测定。
当被测的天然含氮化合物与浓硫酸共热时分解出氨,氨与硫酸反应生成硫酸铵,此过程称为消化。由于消化过程进行缓慢,实验中常添加硫酸钾和硫酸铜的混合物来促进,硫酸铜是催化剂,硫酸钾可提高消化液的沸点。氧化剂过氧化氢也能加速反应。消化完成后,在凯氏定氮仪中加入强碱碱化消化液,使碳酸铵分解出氨。用水蒸汽蒸馏法将氨蒸入无机酸溶液中,然后再用标准酸溶液进行滴定。
上述过程的化学反应如下:
在微量凯氏定氮法中,常用硼酸-指示剂混合液收集氨,氨与溶液中氢离子结合生成铵离子,使溶液中氢离子浓度降低,指示剂颜色发生改变,然后用标准无机酸滴定,直至恢复溶液中原来氢离子浓度,即指示剂变回原来颜色为止。所用无机酸的摩尔数即相当于样品中氨的摩尔数,本法适用范围约为0.2~1mg氨。
因为蛋白质含氮量通常在16%左右,所以将凯氏定氮法测得的含氮量乘上系数6.25,便得到该样品的蛋白质含量。

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