Annexin V凋亡检测常见问题 百萤帮您解答

annexin v作为一种磷脂结合蛋白,与磷脂酰有高度亲和力,它通过细胞外侧暴露的磷脂酰与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此annexin v是检测细胞早期凋亡的灵敏指标。
1.适用仪器
annexin v凋亡检测试剂盒适用仪器:流式细胞仪、荧光显微镜
2.常见问题
什么是annexin v/pi测定?
annexin v/pi测定用于通过annexin v标记区分早期凋亡细胞和通过丙碘胺(pi)标记区分坏死/死亡细胞。在早期凋亡阶段,细胞膜开始失去不对称性,导致磷脂酰(ps)转位到膜的外表面,在此处annexin v共轭物可以检测到它。然而,在细胞膜破裂的情况下,例如坏死,annexin v共轭物可以进入并结合内层膜中的ps残基,导致假阳性结果。因此,建议使用不透过细胞膜的核染料(如pi)与annexin v共轭物一起使用。这使用户可以区分早期凋亡细胞(annexin v染色)、晚期凋亡细胞(annexin v和pi染色)和坏死细胞(仅pi染色)。
annexin v是什么颜色的?
就其本身而言,annexin v 是无色的且难以检测。 为了检测annexin v 与磷脂酰的结合,annexin v 通常与异硫氰酸荧光素 (fitc) 结合,fitc 是一种绿色荧光化合物,激发峰为 491 nm,发射峰为 516 nm。 用 fitc 或任何其他绿色荧光染料标记annexin v,例如 ifluor 488(ex/em = 491/516 nm)。
annexin v和tunel有什么区别?
末端脱氧核苷酸转移酶 dutp 缺口末端标记 (tunel) 是一种染色方法,用于识别细胞内 dna 片段化位点——晚期细胞凋亡的标志性特征。 它使用酶末端脱氧核苷酸转移酶 (tdt) 将修饰的 dntp(例如 dutp)连接到片段化 dna 链的 3'-羟基末端。 dntps 通常用荧光团修饰以促进量化和/或可视化。
annexin v 染色通过结合由于细胞膜不对称性丧失而暴露在细胞外的 ps 残基来识别细胞凋亡的早期阶段。 annexin v 通常用 fitc 等荧光团标记,以促进凋亡细胞的检测。
annexin v阳性是什么意思?
annexin v阳性结果表明细胞处于凋亡的早期状态,该术语通常用于annexin v/pi检测,通过根据细胞群的健康状况来区分细胞群。详情如下:
1.annexin v 阴性/pi阴性:说明细胞很健康
2.annexin v 阳性/pi阳性:说明该细胞处于坏死或凋亡晚期。
什么是annexin v的阳性对照?
annexin v阳性对照是使用已知的细胞凋亡诱导方法诱导凋亡的细胞。 当用annexin v 偶联物(例如膜联蛋白 v-fitc)染色时,这些细胞会产生阳性信号。 例如,细胞凋亡可通过在 55°c 下加热细胞 20 分钟或处理已知可诱导细胞凋亡的细胞试剂(星形孢菌素)来诱导。
什么是annexin v结合缓冲液?
在实验样品中,annexin v结合缓冲液能够促进annexin v与磷脂酰(ps)结合。这些结合缓冲液需要含有足够高浓度的钙,使annexin v与ps结合,但不能高到与其他磷脂结合。annexin v结合缓冲液也可用于洗涤样品,使其不含过量的膜联蛋白和其他化学残留物质,以确保检测。染色前,应将细胞重悬于浓度为1x10^6/ml的annexin v结合缓冲液中。
annexin v是怎样工作的?
annexin v 通过结合暴露在细胞膜外侧的磷脂酰 (ps) 残基来识别正在发生凋亡的细胞。 在活的健康细胞中,ps 残基位于质膜的内层,在那里它们无法与膜联蛋白 v 结合。 当细胞启动程序性细胞死亡(细胞凋亡)时,它们的质膜会失去不对称性。 ps 残基从膜的内部转移到外部小叶,在那里它们可以与膜联蛋白 v 结合。 annexin v 通常与荧光团(如 fitc)结合,以促进凋亡细胞的检测。
annexin v染色后,能否进行细胞固定
可以,细胞可以在annexin v染色后进行固定操作。如果需要固定细胞,请满足以下三个条件:
1.使用不含酒精的醛类固定。
2.请使用含有cacl2的缓冲液。
3.避免使用洗涤剂或表面活性剂。
注意事项:在annexin v染色前,千万不要固定细胞,固定细胞会杀死细胞,而annexin v染色只能在活细胞或组织上进行。
annexin v能染色坏死细胞吗?
是的,annexin v可以染色坏死细胞。坏死是指不正常的细胞死亡,可能由各种事件触发,包括组织缺血和缺氧或细胞区域的急性损伤。坏死细胞的一个关键特征是质膜破裂。这个事件使得annexin v可以进入整个质膜,包括ps残基存在的内叶片,导致假阳性。因此,建议使用细胞不渗透染料(例如丙碘锭或7-aad)与annexin v结合物相结合,以消除假阳性并区分凋亡细胞和死亡细胞。
染色完不能及时上机,样本能固定吗?
细胞染色完成后,禁止固定,应尽快检测,若无法立即检测,可将样本管放冰上,减少外界环境对检测结果的影响,annexin v 结合不稳定,请务必在标记结束后半小时内检测。
以上就是百萤对annexin v凋亡检测常见问题的整理,欢迎大家一起讨论。
关键词:荧光显微镜 流式细胞仪

拟南芥培养箱的优点在于其灵活性和精度
HYBQ(W)无局放充气式高压试验变压器技术参数
ITER加热系统原理图:一个中性束注入器和两种高频电磁波将等离子体加热到1.5亿摄氏度
伺服电机转速范围在多少才算合适
综合布线系统中的测试内容及测试要求安徽快马
Annexin V凋亡检测常见问题 百萤帮您解答
西安市RB401总线接口模块日本横河YOKOGAWA
Q942F电动120度角Y型三通球阀Q942H电动Y型三通球阀的参数
HOTEC ph101仪表规格说明
耒阳防火包带*
乐镤科技采用全浮地式设计的一款电化学工作站
强力电动搅拌机
BOTE博特土壤EC计测量土壤盐度肥力/土壤盐度计
液化气二甲醚分析方法
一套工厂净化车间装修详细方案
超滤膜在水处理中的应用
购买聚氨酯保温管一定要去注意售后问题
肥料养分综合测试仪
水平仪
LM80D PRO/12DPRO激光测距仪的产品特点