省时省力/二维液相分析配方奶粉中的维生素ADE
省时省力, 二维液相分析配方奶粉中的维生素a d e
配方乳——脂溶性维生素
维生素是人和动物为维持正常的生理功能而必须从食物中获得的一种微量有机物质，根据物理性质不同分为水溶性和脂溶性两大类，其中脂溶性维生素a、d、e在人体的视觉能力、免疫功能、抗氧化抗衰老能力等诸方面都有着重要的生理功能。维生素不足会造成人体的亚健康，因此对于维生素的补充越来越受到人们的重视。婴幼儿及成人配方乳品是脂溶性维生素强化的重要形式之一。
配方奶粉基质复杂，我国和欧洲的关于食品中维生素 d 现行标准方法中，需采用正相制备色谱、反相分析色谱两套仪器，分别进行净化制备和分析，分析效率很低。
赛默飞很早提出了二维液相的解决方案，采用一套液相两根色谱柱中心切割的方法可以将维生素a、d、e异构体*分离，方案被伊利、君乐宝等诸多乳品企业所采用。本文在前期研究的基础上，介绍更省时的超快速在线二维方案和既省时又省力的在线固相萃取-二维液相方案。
超快速在线二维方案
本方案仪器配置如下
仪器：thermo fisher vanquish高效液相色谱仪
泵：vanquish dual pump(vf-p32-a-01)
自动进样器：vanquish autosampler (vf-a10-a, 100 μl sample loop)
柱温箱：vanquish column compartment(vh-c10-a, 含两个viper only 2p-6p切换阀)
检测器：vanquish diode array detector hl(含10mm或60mm光纤池)
样品收集环体积：500 μl
色谱软件：变色龙chromeleon 7.3
仪器连接图见图2。
图2 仪器连接图(超快速在线二维方案)
供试品溶液制备
参考gb 5009.82-2016的方法，精密称取固体奶粉试样约10 g(精确到0.01 g)于150 ml平底烧瓶中，用约30 ml 45 ℃～50 ℃温水使其溶解，混匀。于上述处理的试样溶液中加入1.0 g抗坏血酸和0.1 g bht，混匀，加入30 ml无水乙醇，充分混匀后加入约20 ml 0.5 g/g的氢氧化钾水溶液混匀，在80 ℃恒温水浴振荡皂化约30 min后，取出立刻用冷水冷却到室温。
将上述皂化液转移入250 ml分液漏斗中，加入50 ml石油醚-乙mi混合液(1:1, v:v)，振荡萃取5 min，将下层溶液转移至另一个250 ml分液漏斗，加入50 ml石油醚-乙mi混合液再次萃取，合并醚液，用约100 ml水洗涤醚液，重复3次，至醚液洗至中性。
醚液通过无水硫酸钠脱水过滤，滤液收入250 ml圆底烧瓶中，于旋转蒸发仪上在40 ℃水浴旋蒸至约2 ml，立即氮气吹干，用甲醇复溶转移至10 ml容量瓶后定容，上机分析。12min即可完成维生素a、d、e异构体7个化合物的分析，测定谱图见图3。
图3维生素a、d和e混合标准溶液分析谱图(a：维生素a；b：维生素d2和d3；c：维生素e)
在线固相萃取-二维液相方法
上面介绍的超高效液相平台方案给大家节省了分析时间，下面这个方案可在赛默飞常规液相上运行，结合在线固相萃取，可以实现皂化液直接上机分析，省时又省力。
样品皂化过程同上，皂化后，取出立刻用冷水冷却到室温，用50%乙醇水溶液转移并定容到100ml量瓶中。皂化液高速离心5～10min(>5000rpm)后用0.22μm尼龙材质针式过滤器过滤后上机分析。
该方案仪器配置上采用三泵两检测器双阀
实验所用仪器配置如下：
仪器：thermo fisher vanquish高效液相色谱仪
泵：vanquish dual pump(vf-p32-a-01)和vanquish quatery pump (vf-p20-a)
自动进样器：vanquish autosampler (vf-a10-a, 100 μl sample loop)
柱温箱：vanquish column compartment(vh-c10-a, 含两个viper only 2p-6p切换阀
检测器：vanquish diode array detector hl(含10mm或60mm光纤池)，u3000 vwd3100 detector(含11 μl流通池)
样品收集环体积：500 μl
色谱软件：变色龙chromeleon 7.3
仪器连接图见图4，测定谱图见图5和图6。
图4 仪器连接图(在线固相萃取-二维方案)
(点击查看大图)
图5. vd测定谱图(a为对照品，b为样品)
图6. va和ve测定谱图(a为对照品，b为样品)
总结
赛默飞为大家提供了多种维生素a、d、e异构体的测定方案，方案涵盖常规液相和超高效液相、离线spe和在线spe，无论是对于现有仪器的升级改造还是全新平台的建立都可以找到对应的选择。现代化的仪器方法提高了奶粉样品中脂溶性维生素的分析效率，减少了每日多批次样品检测任务的繁重。
“码”上下载
填写表单即刻获取，#formatimgid_11##formatimgid_12#
如需合作转载本文，请文末留言扫描下方二维码即可获取赛默飞全行业解决方案，或关注“赛默飞色谱与质谱中国”公众号，了解更多资讯+
YB43X-10(16)T(P)固定比例式减压阀技术参数
为什么你使用的离心机寿命不如其他的长
意大利欧玛尔OMAL电动执行器的注意事项
铁路道岔
人一氧化氮（NO）试剂盒（ELISA）
省时省力/二维液相分析配方奶粉中的维生素ADE
潍坊春城环保一体化加药装置全自动加药机产品说明
反渗透法优点有哪些
HEYL Br2在线溴分析仪海洋水化学监测的新利器
旋风除尘设备的特点说明
如何延长液氮速冻机的使用寿命
浅谈外圆磨床的磨削热对加工的影响是怎样的
荧光显微镜汞灯使用的注意事项
昆明市实验室污水处理设备
风冷式cod消解仪原理及主要性能特点
两级纯水系统透盐率的特性
屈服强度试验机在应用方面的特点和优势主要体现
无卤素分析常用的检测方案有哪2种
智能温湿度传感器的优势在哪里——乐鸟
肉松馅料水分测试仪操作视频
配方乳——脂溶性维生素
维生素是人和动物为维持正常的生理功能而必须从食物中获得的一种微量有机物质，根据物理性质不同分为水溶性和脂溶性两大类，其中脂溶性维生素a、d、e在人体的视觉能力、免疫功能、抗氧化抗衰老能力等诸方面都有着重要的生理功能。维生素不足会造成人体的亚健康，因此对于维生素的补充越来越受到人们的重视。婴幼儿及成人配方乳品是脂溶性维生素强化的重要形式之一。
配方奶粉基质复杂，我国和欧洲的关于食品中维生素 d 现行标准方法中，需采用正相制备色谱、反相分析色谱两套仪器，分别进行净化制备和分析，分析效率很低。
赛默飞很早提出了二维液相的解决方案，采用一套液相两根色谱柱中心切割的方法可以将维生素a、d、e异构体*分离，方案被伊利、君乐宝等诸多乳品企业所采用。本文在前期研究的基础上，介绍更省时的超快速在线二维方案和既省时又省力的在线固相萃取-二维液相方案。
超快速在线二维方案
本方案仪器配置如下
仪器：thermo fisher vanquish高效液相色谱仪
泵：vanquish dual pump(vf-p32-a-01)
自动进样器：vanquish autosampler (vf-a10-a, 100 μl sample loop)
柱温箱：vanquish column compartment(vh-c10-a, 含两个viper only 2p-6p切换阀)
检测器：vanquish diode array detector hl(含10mm或60mm光纤池)
样品收集环体积：500 μl
色谱软件：变色龙chromeleon 7.3
仪器连接图见图2。
图2 仪器连接图(超快速在线二维方案)
供试品溶液制备
参考gb 5009.82-2016的方法，精密称取固体奶粉试样约10 g(精确到0.01 g)于150 ml平底烧瓶中，用约30 ml 45 ℃～50 ℃温水使其溶解，混匀。于上述处理的试样溶液中加入1.0 g抗坏血酸和0.1 g bht，混匀，加入30 ml无水乙醇，充分混匀后加入约20 ml 0.5 g/g的氢氧化钾水溶液混匀，在80 ℃恒温水浴振荡皂化约30 min后，取出立刻用冷水冷却到室温。
将上述皂化液转移入250 ml分液漏斗中，加入50 ml石油醚-乙mi混合液(1:1, v:v)，振荡萃取5 min，将下层溶液转移至另一个250 ml分液漏斗，加入50 ml石油醚-乙mi混合液再次萃取，合并醚液，用约100 ml水洗涤醚液，重复3次，至醚液洗至中性。
醚液通过无水硫酸钠脱水过滤，滤液收入250 ml圆底烧瓶中，于旋转蒸发仪上在40 ℃水浴旋蒸至约2 ml，立即氮气吹干，用甲醇复溶转移至10 ml容量瓶后定容，上机分析。12min即可完成维生素a、d、e异构体7个化合物的分析，测定谱图见图3。
图3维生素a、d和e混合标准溶液分析谱图(a：维生素a；b：维生素d2和d3；c：维生素e)
在线固相萃取-二维液相方法
上面介绍的超高效液相平台方案给大家节省了分析时间，下面这个方案可在赛默飞常规液相上运行，结合在线固相萃取，可以实现皂化液直接上机分析，省时又省力。
样品皂化过程同上，皂化后，取出立刻用冷水冷却到室温，用50%乙醇水溶液转移并定容到100ml量瓶中。皂化液高速离心5～10min(>5000rpm)后用0.22μm尼龙材质针式过滤器过滤后上机分析。
该方案仪器配置上采用三泵两检测器双阀
实验所用仪器配置如下：
仪器：thermo fisher vanquish高效液相色谱仪
泵：vanquish dual pump(vf-p32-a-01)和vanquish quatery pump (vf-p20-a)
自动进样器：vanquish autosampler (vf-a10-a, 100 μl sample loop)
柱温箱：vanquish column compartment(vh-c10-a, 含两个viper only 2p-6p切换阀
检测器：vanquish diode array detector hl(含10mm或60mm光纤池)，u3000 vwd3100 detector(含11 μl流通池)
样品收集环体积：500 μl
色谱软件：变色龙chromeleon 7.3
仪器连接图见图4，测定谱图见图5和图6。
图4 仪器连接图(在线固相萃取-二维方案)
(点击查看大图)
图5. vd测定谱图(a为对照品，b为样品)
图6. va和ve测定谱图(a为对照品，b为样品)
总结
赛默飞为大家提供了多种维生素a、d、e异构体的测定方案，方案涵盖常规液相和超高效液相、离线spe和在线spe，无论是对于现有仪器的升级改造还是全新平台的建立都可以找到对应的选择。现代化的仪器方法提高了奶粉样品中脂溶性维生素的分析效率，减少了每日多批次样品检测任务的繁重。
“码”上下载
填写表单即刻获取，#formatimgid_11##formatimgid_12#
如需合作转载本文，请文末留言扫描下方二维码即可获取赛默飞全行业解决方案，或关注“赛默飞色谱与质谱中国”公众号，了解更多资讯+
YB43X-10(16)T(P)固定比例式减压阀技术参数
为什么你使用的离心机寿命不如其他的长
意大利欧玛尔OMAL电动执行器的注意事项
铁路道岔
人一氧化氮（NO）试剂盒（ELISA）
省时省力/二维液相分析配方奶粉中的维生素ADE
潍坊春城环保一体化加药装置全自动加药机产品说明
反渗透法优点有哪些
HEYL Br2在线溴分析仪海洋水化学监测的新利器
旋风除尘设备的特点说明
如何延长液氮速冻机的使用寿命
浅谈外圆磨床的磨削热对加工的影响是怎样的
荧光显微镜汞灯使用的注意事项
昆明市实验室污水处理设备
风冷式cod消解仪原理及主要性能特点
两级纯水系统透盐率的特性
屈服强度试验机在应用方面的特点和优势主要体现
无卤素分析常用的检测方案有哪2种
智能温湿度传感器的优势在哪里——乐鸟
肉松馅料水分测试仪操作视频