转染试剂原理及操作方法
转染试剂是由它的体外转染试剂加上一些专有的肽配制而成。与传统的配方相比，这款运用了新的化学试剂，dna浓缩组被显著地释放。主链上连上具有屏蔽效应的肽，用来防止被体内环境的干扰，获得高的体内转染效率。
转染试剂指真核细胞由于外源dna掺入而获得新的遗传标志的过程。哺乳动物的转染技术在60年代末70年代初即已引入。dna转染技术的发展对现代分子生物学产生了巨大的影响。基因转染技术不仅是研究转基因和基因表达的重要工具，而且是目前基因治疗的关键步骤。理想的基因转染试剂应该具有如下特点：1.转染；2.安全；3.低细胞毒性；4.方法简单；5.省时、经济。
转染试剂工作原理：脂质体带正电，可以靠静电作用结合到dna的磷酸骨架上以及带负电的细胞膜表面。使用阳离子脂质体试剂，dna并没有预先包埋在脂质体中，而是带负电dna自动结合到带正电的脂质体上，形成dna-阳离子脂质体复合物。
转染试剂操作简单、快速，为操作者节约大量操作时间。
1. 以24孔细胞板转染实验为例，推荐一次(即每孔)转染实验的低内毒素质粒dna用量为2µg、转染试剂用量为3~5µl(转染试剂的zui适用量需要根据不同细胞和不同培养基来优化，但理论上不超出3~5µl范围)。转染实验中使用无菌生理盐水稀释质粒和转染试剂即可。
2. 为获得zui高转染效率并尽可能降低细胞毒性，建议转染时细胞密度控制在50～80%范围内，而且在不影响转染效率的前提下，尽可能减少转染试剂的用量。
3. 本品极大简化了转染步骤，转染试剂和质粒混合后无需室温静置孵育，可直接加入含血清的细胞培养基中进行转染，而且无需在转染后补加血清或更换培养基。
4. 如果实验目的在于筛选抗药性稳定细胞系，可在细胞传代后直接进行转染试剂实验，从而节省了18~24小时的转染前细胞培养时间！
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2. 为获得zui高转染效率并尽可能降低细胞毒性，建议转染时细胞密度控制在50～80%范围内，而且在不影响转染效率的前提下，尽可能减少转染试剂的用量。
3. 本品极大简化了转染步骤，转染试剂和质粒混合后无需室温静置孵育，可直接加入含血清的细胞培养基中进行转染，而且无需在转染后补加血清或更换培养基。
4. 如果实验目的在于筛选抗药性稳定细胞系，可在细胞传代后直接进行转染试剂实验，从而节省了18~24小时的转染前细胞培养时间！
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