艾迪基因联合华南农业大学开发一种基于CRISPR的快速检测羊奶粉掺假方法

近年来,羊奶市场规模不断上升,开发了品种繁多的羊奶产品,其中羊奶粉是销量的产品。在原料中掺入牛乳成分是常见的方式,因为牛乳成分相似,成本低,而且容易获得。近年来,在羊奶及其乳制品的多次抽样调查中发现掺假现象。掺假不仅侵犯了消费者的利益,而且还可能引起食物过敏。因此,开发一种快速检测羊奶粉掺假的方法十分重要。
华南农业大学的沈兴课题组联合艾迪基因在《foods》上发表了题为“a rapid rpa-crispr/cas12a detection method for adulteration of goat milk powder”的文章,影响因子5.561,本研究建立了一种快速的rpa-crispr/cas12a定性检测牛源性成分掺假羊奶粉的方法。
本研究采用crispr/cas12a检测系统结合重组酶聚合酶扩增(rpa)技术对羊奶粉中牛源性成分的掺假进行定性检测。设计筛选特异性引物和crrna。在对rpa和cas体系进行优化后,建立了rpa- crispr /cas12a检测方法。该检测无需大型设备辅助,可在45分钟内完成牛源性成分的快速鉴定。
rpa-crispr/cas12a法对牛基因组dna的检出率可达10−2 ng/µl,对牛奶粉的检出率可达1% (w/w),可满足现场检测的检测要求。
真实样品测试:共收集55种市售羊奶粉产品进行盲测。结果显示,27.3%的样品中掺入了牛成分,显示出羊奶粉市场掺假情况严重。
总结:本研究建立了一种快速的rpa-crispr/cas12a定性检测牛源性成分掺假羊奶粉的方法。该方法的检出限能很好地满足食品监测的要求,同时保持了较高的特异性。通过对55种市售山羊奶粉产品的小范围调查,发现目前山羊奶粉掺假情况严重。因此,本研究建立的rpa-crispr/cas12a检测方法非常适合用于羊奶中牛源性成分的现场快速检测,可为打击掺假羊奶食品造假提供可靠的技术参考。

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