洁净台、细胞培养箱内部、培养箱水槽、液氮罐,培养间内部的水浴锅等环境被支原体污染,可对工作区域进行消毒。有以下三种方法:
a、甲醛*熏蒸消毒
40%*用量为10ml/m3,*用量为5g/m3先将称好的*放到开放性容器内,然后倒入*人员迅速撤离,密闭消毒空间熏蒸消毒要求密闭消毒24h以上缺点:甲醛有刺激气味,细胞间1-2周无法使用。
b、酒精擦拭
用75%的酒精对超净台、培养箱、桌面等进行擦拭再通风10分钟紫外照射30分钟缺点:操作较为繁琐,酒精容易挥发,消毒维持时间不长。
c、用专门清除支原体的喷雾剂或湿巾消毒
目前,被各大实验室普遍使用的是mycoplasma-offtm喷雾剂和湿纸巾。它添加了可主动杀除支原体的mynox®试剂,可在 几分钟内将支原体确切杀除,无残留,无腐蚀性,无致癌性。
均匀喷于待消毒的洁净台或实验设备表面等待5-10分钟用干燥纸巾将喷过的表面擦拭干净通风2-3分钟对于移液器,门把手,电话等器材,可使用支原体清除湿巾。擦拭后,应让其被消毒物体的表面保持湿润,再让其自然风干。
d、培养箱水槽、培养间内部的水浴锅
水槽经常会成为支原体以及真菌霉菌滋生的污染源。
解决方法:
勤于清洗显得尤为重要。上普遍使用一种水源保护剂0.5%watershieldtm,加入水中,预防水源被支原体、真菌、霉菌污染。此试剂不易挥发。一个月有效。水槽只需定期添水即可。
优点:操作方便,价格便宜。
总之,细胞培养中,支原体污染发生频繁。有时带来的危害会造成实验的巨大损失。应经常检测和及时排除支原体污染,让细胞在健康安全的环境下生长,为获得准确的实验结果,打下良好的基础。
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