脑粘体虫探针法荧光定量PCR检测试剂盒应用案例
脑粘体虫探针法荧光定量pcr检测试剂盒应用案例：
样品 dna 的制备
1.用自选方法纯化样品的 dna，本试剂盒跟市场上大多数病毒 dna 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 dnaout 或其升级版柱式病毒 dnaout。 本试剂盒免费赠送 15 次 dna 病毒裂解液试用装（一管式病毒 dnaout 的成分）。
稀释阳性对照（以 10e2-10e7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的长为 86bp 的 dn段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μl 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4.在 7 号管中加入 5 μl 1×10e8 拷贝/μl 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10e7 拷贝/μl 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头，在 6 号管中加入 5 μl 1×10e7 拷贝/μl 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10e6 拷贝/μl 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头，在 5 号管中加入 5 μl 1×10e6 拷贝/μl 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10e5 拷贝/μl 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头，在 4 号管中加 5 μl 1×10e5 拷贝/μl 的阳性对照到 4 号管中，得1×10e4 拷贝/μl 的阳性对照。放冰上待用
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qpcr 反应（20 μl 体系，在样品制备室进行）
9.在 pcr 管中加入下列成分。
试剂使用须知：
（1）请参照相关法规、文献、msds等信息，理解并掌握好试剂的特性，再进行安全操作。产品仅用于科研
（2）通常购买试剂时一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的话，更加注意其他保管和管理。
（3）万一试剂操作者并非专业技术人员。必须在专业人士的指导监督下进行操作。对于使用后的废弃物，不要或者旧的试剂，应按照相关法律法规正当处理。
（4）购买后，请务必确认标签上的注意事项；做好预防颠倒，摔坏的措施和管理体制；在使用前再次确认标签上的注意事项，做好必要的安全对策；对没有标明其危害特性、有害特性的，也要慎重地进行操作；必须带好防护用具，小心翼翼进行操作。
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3.用带芯枪头分别加入 45 μl 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4.在 7 号管中加入 5 μl 1×10e8 拷贝/μl 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10e7 拷贝/μl 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头，在 6 号管中加入 5 μl 1×10e7 拷贝/μl 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10e6 拷贝/μl 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头，在 5 号管中加入 5 μl 1×10e6 拷贝/μl 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10e5 拷贝/μl 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头，在 4 号管中加 5 μl 1×10e5 拷贝/μl 的阳性对照到 4 号管中，得1×10e4 拷贝/μl 的阳性对照。放冰上待用
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qpcr 反应（20 μl 体系，在样品制备室进行）
9.在 pcr 管中加入下列成分。
试剂使用须知：
（1）请参照相关法规、文献、msds等信息，理解并掌握好试剂的特性，再进行安全操作。产品仅用于科研
（2）通常购买试剂时一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的话，更加注意其他保管和管理。
（3）万一试剂操作者并非专业技术人员。必须在专业人士的指导监督下进行操作。对于使用后的废弃物，不要或者旧的试剂，应按照相关法律法规正当处理。
（4）购买后，请务必确认标签上的注意事项；做好预防颠倒，摔坏的措施和管理体制；在使用前再次确认标签上的注意事项，做好必要的安全对策；对没有标明其危害特性、有害特性的，也要慎重地进行操作；必须带好防护用具，小心翼翼进行操作。
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