微生物法分析食品中*含量的简要步骤
*是一种水溶性的维生素，是介导一碳单位转移极其重要的辅助因子。在植物中，蛋白质、核苷酸、泛酸的合成以及分子的甲基化都需要一碳单位的参与。人体自身不能合成*，缺乏*就会导致巨幼红细胞贫血和胎儿发育缺陷，*缺乏同样会引起高同型半*血症，它是冠状动脉疾病和中风发作的条件之一。
随着人们对*研究的不断深入，对*含量的检测就显得尤为重要。食品中检测*含量的方法优选微生物法，是根据鼠李糖乳杆菌（atcc 7469）对**的特异性，需要*作为其生长所必需的因子，并且在一定条件下，其生长与繁殖速度与溶液中*的含量成一定的对应关系，微生物法就是根据此原理对该维生素进行定量。微生物法的分析步骤一般分为以下几步：
测试菌液的制备，包括日常固体培养基上菌种的转接活化及液体种子培养液的制备。
试样及标准的制备，包括试样管和标准曲线管的制作。
测定用培养基的制备，可选用上himedia公司生产的*测定用培养基（货号：m543）。
灭菌，接种，置于37℃±1℃恒温培养箱中培养20h~40h，直至获得大浑浊度。
测定，方法主要是光密度法，以标准系列管*含量为横坐标，每个标准品透光率（或吸光值）均值为纵坐标，绘制标准曲线。测定样品的od值。
计算，根据标准曲线对样品中的*含量进行定量。
微生物法测定*含量另外一个关键的步骤就是从复杂的食品基质中提取*，提取方法对结果的影响占整个实验误差的很大部分。提取方法的选择基于以下几方面：
食品基质的特性；
食品基质中维生素存在的形式(是原生形式的所占比重大还是添加形式比重大，游离态较多还是结合态较多以及结合态的结合形式也不尽相同)；
维生素对热和ph值的稳定性；
分析方法的选择性和特异性。通常，*的提取方法包括用缓冲液或硫酸溶液进行水解、调节ph值沉淀蛋白或者使用合适的蛋白沉淀剂、用合适的酶进行酶解等。
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