菌种的保藏常采用干燥、低温和隔绝空气等措施,将其新陈代谢限制在较低范围内,使其生命活动处于半长期性的休眠状态,使菌种能够存活、不污染杂菌、不发生或较少发生变异,保存菌种原有的各种生物学性状。
较常用的菌种保藏法有斜面或半固体传代保藏法,以及冷冻真空干燥法和液氮超低温保藏法等。其它尚有载体保藏法和悬液保藏法等。
斜面或半固体传代保藏法:
此法保藏菌种常用的培养基有普通肉汤琼脂斜面、血清斜面、血琼脂斜面、鸡蛋斜面和血清肉汤半固体培养基等等。在斜面或半固体培养基表面,往往加入灭菌液体石蜡,用以隔绝空气。此外,厌氧菌的传代保藏则常采用疮肉基。
冷冻真空干燥法:
将加入一定保护剂(如无菌脱脂牛奶)的菌种悬液冷冻,然后在冻结状态下经过真空干燥,使菌种处于半长期性的休眠状态,从而达到长久保藏的目的。一般可保藏数年甚至数十年之久。该法需要特殊的低温干燥设备 。
液氮超低温保藏法:
将保藏的菌种分散在保护剂中(如甘油、二甲亚枫、蔗糖和吐温80等),或将平板上生长良好的培养物打块,原封不动地置于保护剂中,预冻后保藏在液氮超低温(-196℃)中。该法是目前较理想的菌种保藏方法,可较长期保藏菌种。
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