组织研磨机对提取动物关节软骨组织总RNA

实验目的研磨破碎软骨组织（大鼠膝关节软骨），提取其总rna。实验原理充分磨碎软骨样品（大鼠膝关节软骨），再用相关试剂提取其总rna。实验材料和器具样品：大鼠膝关节软骨仪器：多样品组织研磨仪耗材：研磨罐，研磨珠试剂：液氮若干实验步骤1.研磨软骨组织1.1 取适量大鼠膝关节软骨组织，剪切成约1立方厘米小块；1.2 将小块软骨组织置于液氮中2分钟或放入-80度冰箱冷冻30分钟；1.3 将样品和研磨珠放入研磨罐中，盖好盖子；1.4 将装好样品及钢珠的研磨管，放入已经在-20度冰箱预冷好的适配器中，加入变性液，β-巯基乙醇；1.5 将适配器放入净信研磨仪中，在14单位频振条件下，研磨1min，可得到匀浆状的软骨组织；2.总rna提取2.1 冰水浴下，加酸性水饱和酚，摇匀，加醋酸钠，氯fang、异戊醇混合液，冰水浴上15min；2.2 4℃下，离心，取上清液，加氯fang、异戊醇混合液，离心取上清，加异丙醇，-20℃下沉淀，离心，得到凝胶状rna和蛋白多糖混合沉淀，加无rna酶水，溶解得胶状溶液；2.3 取胶状溶液用plant rnaout试剂盒的rna提取步骤得到总rna沉淀，取沉淀，乙醇洗涤后用无rna酶水溶解沉淀，即得关节软骨组织总rna溶液。

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