在elisa中,进行各项试验条件的挑选十分重要,今日我司就带您大概了解一下试验条件的挑选包含哪些:
1.固相载体的挑选:
载体的种类有多种,如聚苯乙烯,聚氯乙烯和纤维素等,我们通常用的聚苯乙烯塑料微量滴定板,其优点在于吸附蛋白的性能较好,操作简洁、用量小、适于大批检测。
2.载体的吸附条件:
载体的吸附均为物理吸附,吸附一般要求ph在9.0~9.6之间。时刻、温度、蛋白的浓度、离子的强度必定要恰到好处。一般选用4℃过一夜。
3.酶标抗体运用浓度的确认:
于聚苯乙烯板中加足够的抗体包被温育必定时刻, 酶标结合物倍比稀释,找出od值1,为zui合适酶标抗体稀释度。
4.抗原的要求:
用于elisa的抗原有必要选用适当纯的抗原,假如含有其它杂质,将与抗原共同竞争的固相载体上的有限位置。
5.抗体的要求:
必定是要与抗原对应的抗体,化学结构和空间结构上其具有很高特异性反应。
6.反应时刻:
抗原与抗体、抗体与酶标抗体反应一般在37度1~2小时到达。时刻太短敏感性下降,时刻太长吸附的抗原或复合物可能掉落。
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