农药残留速测仪测定原理以及方法介绍
农药残留速测仪测定原理以及方法介绍
1、农药残留速测仪检测原理
农残速测仪检测原理是采用酶抑制法，在一定条件下。有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制*酯酶的活性，其抑制率与农药的浓度星正相关11-21。在正常情况下，酶催化代谢产物水解．其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在410am处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率的大小可以判断样品中是否有高剂量的有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
2、农残速测方法
2．1试剂配制与保存
2．1．1缓冲液。用量筒量取500ml蒸馏水，先用少量（100一150ml）的蒸馏水缓缓倒入放有缓冲剂干粉的量杯中，用玻棒搅拌至*溶解后将量筒中剩余的蒸馏水倒人量杯中充分搅拌（摇匀），待用。
2．1．2显色剂。用刻度吸管吸5．2ml缓冲液注入显色剂瓶中，盖上盖摇匀，置于0—5℃环境中备用，切勿冷冻。
2．1．3底物。用刻度吸管吸5．2ml蒸馏水注入底物干粉瓶中，盖上盖摇匀，置于叽5cc环境中备用。
2．2样液制备
取干净的蔬菜，用天平准确称取2g，叶菜取叶片部分，果菜横截削下一片，叶片、瓜肉等剪成icm2，置于100ml小烧杯内；用吸管吸10ml缓冲液注入小烧杯中，振荡提取2min左右；提取结束后静置2—3min，取上层清液作为样液。
2．3仪器操作与样品测定
2．3．1仪器预热。接通电源，仪器自检，自检结束后待机预热10min．仪器工作稳定后进行测量13-71。
2．3．2对照测定。向检测板zui左排比色孔中用的移液枪分别加10卜l酶试剂，再用250斗l移液枪吸取250斗l缓冲液于比色孔，按上下键选择‘启动振板’菜单后按‘确认’键启动振板10s，振板结束后。让酶试剂和缓冲液混合液静置反应10min，用的移液枪向比色孔分别加入lo斗l显色剂和10斗l底物，立即将检测板放入托盘，按‘对照’键测量（反应时间设为lmin）。测试结束，按‘确认’键显示对照吸光度变化值。待空白对照值的吸光度变化值在0．15加．30，才可测定样品。否则要重新做空白测定。测量结束后仪器自动保存当前的对照值，下一次测量样品时就可以
2．3．3样品测定。若已完成各通道的对照测试，将检测板上所有比色孔作为样品测量。用不同移液枪分别给比色孔加酶液10‘l／孔，加注样品液250斗【／孔，显色剂lo斗l／孔。操作步骤同对照测试，zui后按‘样品’键测量，测试结束后，显示当前测量的样品抑制率结果和吸光度变化值。可根据需要打印被测样品抑制率。
2．3．4测试结果的判定。测定结果以抑制率表示。根据gb／t5009．199—2003判定要求，当样品对酶的抑制率≥50％时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果。阳性结果的样品需重复测2次以上。
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2．1．1缓冲液。用量筒量取500ml蒸馏水，先用少量（100一150ml）的蒸馏水缓缓倒入放有缓冲剂干粉的量杯中，用玻棒搅拌至*溶解后将量筒中剩余的蒸馏水倒人量杯中充分搅拌（摇匀），待用。
2．1．2显色剂。用刻度吸管吸5．2ml缓冲液注入显色剂瓶中，盖上盖摇匀，置于0—5℃环境中备用，切勿冷冻。
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2．2样液制备
取干净的蔬菜，用天平准确称取2g，叶菜取叶片部分，果菜横截削下一片，叶片、瓜肉等剪成icm2，置于100ml小烧杯内；用吸管吸10ml缓冲液注入小烧杯中，振荡提取2min左右；提取结束后静置2—3min，取上层清液作为样液。
2．3仪器操作与样品测定
2．3．1仪器预热。接通电源，仪器自检，自检结束后待机预热10min．仪器工作稳定后进行测量13-71。
2．3．2对照测定。向检测板zui左排比色孔中用的移液枪分别加10卜l酶试剂，再用250斗l移液枪吸取250斗l缓冲液于比色孔，按上下键选择‘启动振板’菜单后按‘确认’键启动振板10s，振板结束后。让酶试剂和缓冲液混合液静置反应10min，用的移液枪向比色孔分别加入lo斗l显色剂和10斗l底物，立即将检测板放入托盘，按‘对照’键测量（反应时间设为lmin）。测试结束，按‘确认’键显示对照吸光度变化值。待空白对照值的吸光度变化值在0．15加．30，才可测定样品。否则要重新做空白测定。测量结束后仪器自动保存当前的对照值，下一次测量样品时就可以
2．3．3样品测定。若已完成各通道的对照测试，将检测板上所有比色孔作为样品测量。用不同移液枪分别给比色孔加酶液10‘l／孔，加注样品液250斗【／孔，显色剂lo斗l／孔。操作步骤同对照测试，zui后按‘样品’键测量，测试结束后，显示当前测量的样品抑制率结果和吸光度变化值。可根据需要打印被测样品抑制率。
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