PCR基因扩增仪的工作原理
基因扩增仪性能，能满足不同工作环境的多种需求。可用作以聚合酶链式反应为特征的、以检测dna/rna为目的的各种病原体检测及基因分析。基因扩增仪广泛应用于分子生物学、医学、食品工业、司法科学、生物技术、环境科学、微生物学、临床诊断、流行病学、遗传学、基因芯片、基因检测、基因克隆、基因表达等领域。
基因扩增仪性能，能满足不同工作环境的多种需求。可用作以聚合酶链式反应为特征的、以检测dna/rna为目的的各种病原体检测及基因分析。基因扩增仪广泛应用于分子生物学、医学、食品工业、司法科学、生物技术、环境科学、微生物学、临床诊断、流行病学、遗传学、基因芯片、基因检测、基因克隆、基因表达等领域。
1、基因扩增的基本要素
基因扩增的基本要素与dna复制的基本要素是一致的。
①dna模板：待拷贝的dna称为模板，它可以是双链dna也可是单链dna，后扩增得到的产物是双链状态的。
②引物：是dna复制的先锋，就象结晶过程中的晶核，引导dna的合成。在pcr扩增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。
③dna聚合酶(taqdna聚合酶)：是dna复制的动力，在dntp等底物存在时在引物的引导下沿着模板dna合成互补的dna链。
④缓冲液：提供dna合成反应所需的ph，离子强度等环境。
⑤4种单核苷酸：dntp，提供dna合成原料。
2、基因扩增仪原理
基因扩增仪是利用pcr技术对特定基因做体外的大量合成，用于以检测dna/rna为目的的各种基因分析。
pcr反应一般设置20~40次循环，每一循环包括高温变性、低温退火、中温延伸三步反应。每一循环的产物作为下一个循环的模板。pcr的扩增效率很高，如果循环次数是30次，那么新生dna片段理论上达到230拷贝(约为109个分子)。pcr反应每个循环的三个基本反应步骤如下：
①模板dna的变性：模板dna经加热至94℃左右一定时间后，使模板dna双链或经pcr扩增形成的双链dna产物解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备;
②模板dna与引物的退火(复性)：模板dna经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板dna单链的互补序列配对结合;
③引物的延伸：温度升到72℃左右，dna模板-引物结合物在taqdna聚合酶的作用下，以dntp为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板dna链互补的半保留复制链。重复循环变性-退火-延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。到达平台期所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。
基因扩增仪的用途基因扩增仪灵敏度高，操作起来简便、快捷，加上对特定基因样本纯度要求低，因而被广泛地运用在以下检测活动中:
1、医学和健康检验机构临床诊断，用于判断检体中是否会表现某遗传疾病的图谱、传染病的诊断以及基因复制。
2、dna鉴定，常见于司法鉴定领域。
3、临床分子诊断试剂和生物试剂公司药品研发。
4、转基因、微生物、动物源性成分检测，常见于医药卫生及农产品检验领域。
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①dna模板：待拷贝的dna称为模板，它可以是双链dna也可是单链dna，后扩增得到的产物是双链状态的。
②引物：是dna复制的先锋，就象结晶过程中的晶核，引导dna的合成。在pcr扩增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。
③dna聚合酶(taqdna聚合酶)：是dna复制的动力，在dntp等底物存在时在引物的引导下沿着模板dna合成互补的dna链。
④缓冲液：提供dna合成反应所需的ph，离子强度等环境。
⑤4种单核苷酸：dntp，提供dna合成原料。
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②模板dna与引物的退火(复性)：模板dna经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板dna单链的互补序列配对结合;
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