gelred是一种稳定、安全、灵敏的核酸荧光染料,通过静电及电荷相互作用结合到核酸上,可直接替代剧毒的溴化乙锭(eb),且灵敏度远高于eb,常用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中dsdna(双链dna)、ssdna(单链dna)或rna的染色。gelred结合单链dna和rna荧光信号约是结合双链dna的一半左右。
经过一系列的测试,gelred对于手套和细胞膜都是不能穿透的。在浓度远高于凝胶染色工作浓度的情况下,染料也是无细胞毒性和非诱变性的。
gelred是如何工作的?
与溴化乙锭一样,gelred是一种嵌入dna的核酸染料。gelred仅通过嵌入结合。
当显示紫外光时,嵌入的gelred会发出荧光,产生明亮的橙色光。 两种产品的光谱几乎相同; 然而,gelred被认为是比etbr更安全的替代品,而且更敏感。gelred的另一个好处是它能够与dsdna、ssdna和rna一起工作,而对于dsdna,它的灵敏度是ssdna和rna的两倍。
比较gelred和溴化乙锭(eb)在1%琼脂糖预制凝胶(tbe缓冲溶液)中的染色效果。使用1kb plus dna ladder样品两倍梯度稀释上样,各泳道上样量从左到右依次为200ng,100ng,50ng和25ng。使用300nm激发的凝胶成像系统和eb滤光片成像并使用polaroid 667黑白打印
如果gelred是一种嵌入剂,为什么它没有与溴化乙锭相同的风险?
如果它仍然要直接与dna结合,想知道它如何才能真正安全似乎是合乎逻辑的。 虽然gelred和etbr都嵌入dna,但gelred的创建使其不会穿透细胞膜。 因为它不能穿透细胞膜,所以gelredtm对活细胞没有毒性。
gelred:用于聚丙烯酰胺凝胶(page)的核酸凝胶染色剂
原始的gelred®染料的安全性部分得益于其较大的分子尺寸,这使得该染料对于细胞膜具有不可渗透性。然而,这种大分子尺寸也会降低gelred®染料进入密集的聚丙烯酰胺凝胶的能力。为了解决这个问题,biotium采用了一种新方法,使得新版本的page gelred®染料具有细胞膜不可渗透性,而不会使其分子尺寸过大
page gelred®核酸凝胶染料:
• 一种安全而敏感的聚丙烯酰胺凝胶染料
• 在ames试验中无毒性和无致突变性
• 水基配方,不渗透乳胶和丁腈手套
• 对水生生物无毒,可由epa title 22危险废物测试进行排放处置。
为什么gelred会改变dna的迁移?
gelredtm影响dna迁移的原因有很多。 请记住,所有核酸染料都会对dna的移动方式产生一定的影响。gelredtm是一种比etbr重得多的染料,gelred对dna的亲和力意味着凝胶中加载的dna越多,gelredtm与dna结合并扭曲该片段的运动的次数就越多。
一些防止或最小化gelred对迁移影响的建议是: 将其用作后染色剂(我们对此再强调不过分)。 确保您的gelred储备溶液已适当稀释。 您可能还需要减少您使用的dna量,以尽量减少迁移干扰的影响。
gelred和gelgreen有什么区别?
1.每种产品的荧光。 如您所料,gelred会发出类似于溴化乙锭的红色荧光。gelgreen会发出与sybr green非常相似的绿色荧光。 任何一种产品都可以与紫外线透射仪一起使用。
2.染色敏感性。gelred是一种比gelgreen更敏感的染色剂(灵敏度大约是gelgreentm的五倍),尤其是对于单链核酸。
3.在应用方面,gelred与聚丙烯酰胺凝胶兼容,但不推荐用于gelgreen。
4.使用gelgreen的一个优点是它与蓝光透射仪的兼容性,如果您想避免紫外线照射,这将很有帮助
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