液相色谱仪的操作小要求
操作液相色谱仪的要求
1.流动相必须用hplc级的试剂，使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45μm或更细的膜过滤)。
2.流动相过滤后要用超声波脱气，脱气后应该恢复到室温后使用。
3.不能用纯乙腈作为流动相，这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。
4.使用缓冲溶液时，做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时，然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上，以充分洗去离子。对于柱塞杆外部，做完样品后也必须用去离子水冲洗20ml以上。
5.长时间不用仪器，应该将柱子取下用堵头封好保存，注意不能用纯水保存柱子，而应该用有机相(如，甲醇等)，因为，纯水易长霉。
6.每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。
7.c18柱不能进蛋白样品，血样、生物样品。
8.堵塞导致压力太大，按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗，清洗方法：
①以异丙醇作溶剂冲洗；
②放在异丙醇中间用超声波清洗；
③用10%稀硝酸清洗；
9.气泡会致使压力不稳，重现性差，所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。
10.如果进液管内不进液体时，要使用注射器吸液：通常在输液前要进行流动相的清洗。
11.要注意柱子的ph值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱性样品。
12.更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗，然后插入新的流动相中。更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。
举个例子：
1.泵
泵是液相色谱仪的心脏。处于良好工作状态的泵，基线平稳，保留时间重现性好，梯度洗脱时压力变化缓慢而且平稳：
1)选择优质的溶剂和试剂，在进入仪器前用 0.45μm 膜过滤，并进行脱气处理;
2)泵开始使用时，一定要用合适的流动相*清洗干净;
3)定期检查并更换在线过滤片及有关的垫圈，经常清洗进液处的微孔滤头;
4)改变流动相时，应注意沉淀的产生，以防止泵堵塞;
2.色谱柱
色谱柱是化合物分离的关键。保养良好的色谱柱具有很高的塔板数，基线平稳:
1)色谱柱比较娇气不能够碰撞、弯曲或强烈震荡;安装时要保证阀件或管路的清洁;
2)流动相在使用前必须进行脱气处理，尽量不使用或少使用高粘度的流动相;
3)在满足灵敏度的前提下，尽可能的使用小进样量。如果样品比较脏，要进行净化或提纯处理;
4)分析结束后要清洗掉进样阀中残留的样品，并用流动相或适当的溶剂清洗色谱柱;
5)如，*不用，用适当的有机溶剂保存并封闭或定期补充合适的流动相。
3.检测器
分析完成后，马上关闭检测器。
4.进样器
分析结束后反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染或堵塞。
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4.使用缓冲溶液时，做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时，然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上，以充分洗去离子。对于柱塞杆外部，做完样品后也必须用去离子水冲洗20ml以上。
5.长时间不用仪器，应该将柱子取下用堵头封好保存，注意不能用纯水保存柱子，而应该用有机相(如，甲醇等)，因为，纯水易长霉。
6.每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。
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8.堵塞导致压力太大，按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗，清洗方法：
①以异丙醇作溶剂冲洗；
②放在异丙醇中间用超声波清洗；
③用10%稀硝酸清洗；
9.气泡会致使压力不稳，重现性差，所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。
10.如果进液管内不进液体时，要使用注射器吸液：通常在输液前要进行流动相的清洗。
11.要注意柱子的ph值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱性样品。
12.更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗，然后插入新的流动相中。更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。
举个例子：
1.泵
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2)泵开始使用时，一定要用合适的流动相*清洗干净;
3)定期检查并更换在线过滤片及有关的垫圈，经常清洗进液处的微孔滤头;
4)改变流动相时，应注意沉淀的产生，以防止泵堵塞;
2.色谱柱
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1)色谱柱比较娇气不能够碰撞、弯曲或强烈震荡;安装时要保证阀件或管路的清洁;
2)流动相在使用前必须进行脱气处理，尽量不使用或少使用高粘度的流动相;
3)在满足灵敏度的前提下，尽可能的使用小进样量。如果样品比较脏，要进行净化或提纯处理;
4)分析结束后要清洗掉进样阀中残留的样品，并用流动相或适当的溶剂清洗色谱柱;
5)如，*不用，用适当的有机溶剂保存并封闭或定期补充合适的流动相。
3.检测器
分析完成后，马上关闭检测器。
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