游离DNA提取试剂盒的操作手段
近几年来，随着基因诊断技术的发展，游离dna的应用价值越来越大，如优生筛查、肿瘤早期诊断、遗传病检测和病原体感染基因检测等。游离dna是存在于血液(血浆或血清)、脑脊液等体液中的细胞外dna，也叫循环dna。其主要是由单链或双链dna以及单链与双链dna的混合物组成，以dna和蛋白质复合物或游离dna两种形式存在。分析血液中肿瘤特异性的胞外dna片段可对普通血液样品进行特异性地肿瘤类型检测。游离dna提取试剂盒的操作手段你知道吗？
1.请自行准备：无水乙醇、1.5ml离心管。
2.取出洗涤液，按以下操作：
a)洗涤液a：21ml加入9ml无水乙醇；42ml加入18ml无水乙醇。b)洗涤液b：9ml加入21ml无水乙醇；18ml加入42ml无水乙醇。c)配制好的洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。
3.取1.5ml离心管，加入200μl样本，4μldnacarrier混合均匀，加入300μl裂解液及20μl消化液，振荡混匀，56℃水浴10分钟。
4.加入1000μl无水乙醇，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响dna的提取与后续实验。
5.将吸附柱放入收集管内，将760μl上述溶液转入吸附柱内，静置2分钟，12,000rpm4℃离心1分钟，弃收集管内废液；
6.将吸附柱放回收集管内，将剩余760μl溶液转移至吸附柱内，重复步骤5。
7.将吸附柱放回收集管内，加500μl洗涤液a至吸附柱内，12,000rpm4℃离心1分钟，弃收集管内废液。
8.将吸附柱放回收集管内，加500μl洗涤液b至吸附柱内，12,000rpm4℃离心1分钟，弃收集管内废液。
9.将吸附柱放回收集管内，12,000rpm4℃离心2分钟，离去残留的洗涤液。
10.取出吸附柱，放入新的1.5ml离心管内，加入30-50μl洗脱液，静置3分钟，12,000rpm4℃离心2分钟，收集dna溶液。提取的dna即可用于下一步实验或-20℃保存。
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5.将吸附柱放入收集管内，将760μl上述溶液转入吸附柱内，静置2分钟，12,000rpm4℃离心1分钟，弃收集管内废液；
6.将吸附柱放回收集管内，将剩余760μl溶液转移至吸附柱内，重复步骤5。
7.将吸附柱放回收集管内，加500μl洗涤液a至吸附柱内，12,000rpm4℃离心1分钟，弃收集管内废液。
8.将吸附柱放回收集管内，加500μl洗涤液b至吸附柱内，12,000rpm4℃离心1分钟，弃收集管内废液。
9.将吸附柱放回收集管内，12,000rpm4℃离心2分钟，离去残留的洗涤液。
10.取出吸附柱，放入新的1.5ml离心管内，加入30-50μl洗脱液，静置3分钟，12,000rpm4℃离心2分钟，收集dna溶液。提取的dna即可用于下一步实验或-20℃保存。
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